Кроличье моноклональное антитело против p38 MAPK для Вестерн-блоттинга, IF/ICC, ELISA - Q16539

Основные характеристики и параметры продукта

Биологический контекст: Функция и локализация p38 MAPK (MAPK14)

• MAPK14 представляет собой серин/треониновую киназу, которая служит ключевым компонентом пути p38 MAP-киназы. Активируемая провоспалительными цитокинами и различными стрессовыми факторами, она регулирует обширную сеть нижестоящих субстратов (по оценкам, 200–300 мишеней), контролируя разнообразные клеточные процессы, включая экспрессию генов, стабильность мРНК, трансляцию и обновление белков.
• Через фосфорилирование нижестоящих киназ MSK1/2 и MAPKAPK2/3/MNK1/2, MAPK14 координирует транскрипционную и посттранскрипционную регуляцию. MSK1/2 активируют факторы транскрипции (CREB1, ATF1, NF‑κB, STAT1/3) и непосредственно фосфорилируют гистон H3 и HMGN1, способствуя ремоделингу хроматина и индукции ранних генов. MAPKAPK2/3 контролируют стабильность мРНК через ZFP36 и ELAVL1, в то время как MNK1/2 модулируют трансляцию через фосфорилирование eIF4E2. Связанные ссылки: PMID:9687510, PMID:9792677, PMID:11154262
• MAPK14 непосредственно фосфорилирует ряд факторов транскрипции, включая TP53/p53 (в сотрудничестве с казеинкиназой II), ATF1, ATF2, ELK1 и MEF2C/MEF2A, связывая сигналы стресса с репрограммированием транскрипции. Связанные ссылки: PMID:10747897, PMID:10330143, PMID:9430721, PMID:9858528
• Киназа регулирует деградацию белка и динамику мембранных рецепторов. Она фосфорилирует CFLAR, способствуя протеасомной деградации, контролирует активность убиквитинлигазы SIAH2 и вмешивается в транспорт ATG9 для модуляции аутофагии. Более того, MAPK14 фосфорилирует эффекторы EGFR и RAB5A, регулируя опосредованный клатрином эндоцитоз, и активирует опосредованный ADAM17 сброс эктодомена лигандов EGFR. Связанные ссылки: PMID:17003045, PMID:19893488, PMID:16932740, PMID:20188673
• MAPK14 участвует в контрольных точках клеточного цикла и ответах на повреждение ДНК. Она фосфорилирует CDC25B и CDC25C, обеспечивая связывание с 14‑3‑3 и инициируя G2-задержку после УФ-облучения. При повреждении ДНК она фосфорилирует TIAR, что высвобождает TIAR из мРНК GADD45A и предотвращает деградацию транскрипта. Связанные ссылки: PMID:11333986, PMID:20932473
• Необходима для роста сосудов плацентарного лабиринта и стресс-индуцированного эритропоэза через регуляцию экспрессии гена EPO. MAPK14 также запускает активацию инфламмасомы NLRP1 нижестоящей от столкновений рибосом, приводя к пироптозу. Кроме того, во время инфекции M. tuberculosis бактериальный белок EsxA фосфорилирует MAPK14, подавляя продукцию IFN‑γ в Т-клетках. Связанные ссылки: PMID:10943842, PMID:35857590, PMID:21586573
• MAPK14 экспрессируется в широком спектре тканей, с наивысшими уровнями в мозге, сердце, плаценте, поджелудочной железе и скелетных мышцах; более низкая экспрессия наблюдается в легких, печени и почках. Локализуется как в цитоплазме, так и в ядре. Альтернативный сплайсинг продуцирует изоформы, такие как MXI2 (с пониженной киназной активностью) и EXIP (проапоптотическая). Белок подвергается множественным посттрансляционным модификациям, включая фосфорилирование, ацетилирование и убиквитин-подобное конъюгирование.

Экспериментальные рекомендации и технические советы

• Иммуноген (синтетический пептид, соответствующий аминокислотам 100‑200) находится в консервативной области; следовательно, ожидается перекрестная реактивность с MAPK14 мыши и крысы. Перед регулярным использованием проверяйте реактивность в соответствующих видоспецифичных клеточных или тканевых лизатах.
• Для Вестерн-блоттинга рассмотрите возможность использования экстрактов целых клеток из стрессированных и покоящихся клеток для наблюдения фосфо-специфичных сдвигов полос. Всегда включайте соответствующие контроли (например, антитела к фосфо-p38, ингибиторы киназы) для обеспечения специфичности сигнала.
• При иммунофлуоресценции/ICC оптимизируйте условия фиксации/пермеабилизации и подтвердите характер окрашивания, соответствующий цитоплазматическому и ядерному распределению. Рекомендуется совместное окрашивание с маркерами компартментов.
• Для ELISA используйте рекомбинантный человеческий белок MAPK14 в качестве стандарта и проверяйте линейность детекции. Сопрягите это антитело с подходящим детектирующим антителом для разработки чувствительного сэндвич-ELISA.
• Поскольку MAPK14 проявляет киназонезависимые функции и имеет множественные изоформы, убедитесь, что ваши экспериментальные показатели отражают конкретную роль, которую вы намереваетесь изучить.

CamelBio: Ваш мост для комплексного снабжения

CamelBio предлагает разработчикам диагностических систем, исследовательским институтам и лабораториям оптимизированное решение для закупки сырья для ИХА, от моноклональных и поликлональных антител до объемных реагентов и технического консалтинга. Для проектов, посвященных сигналингу p38 MAPK, воспалению или путям стрессового ответа, мы обеспечиваем стабильный доступ к валидированным антителам, таким как это кроличье моноклональное антитело против p38 MAPK, а также возможность поиска материалов для редких мишеней, позволяя вам эффективно продвигаться от ранних стадий исследований до клинического применения.