Поликлональные антитела против p38 MAPK для WB, IHC-P, IF/ICC, IP, ELISA - Q16539

Основные спецификации и параметры продукта

Биологический фон: Функция и локализация p38 MAPK

• Митоген-активируемая протеинкиназа 14 (MAPK14), известная как p38 альфа, представляет собой активируемую стрессом серин/треониновую киназу, принадлежащую к семейству MAP-киназ. Она существует в виде нескольких изоформ, включая EXIP и MXI2, образующихся в результате альтернативного сплайсинга.

• При активации внеклеточными сигналами, такими как провоспалительные цитокины или физический стресс, p38 фосфорилирует нижестоящие киназы MSK1/2, которые затем регулируют факторы транскрипции (CREB1, NF-κB, STATs) и гистон H3 (PubMed:9687510, PubMed:9792677). Она также активирует MK2/3 для контроля стабильности мРНК через ZFP36 и ELAVL1, а также MNK1/2 для фосфорилирования EIF4E2 при инициации трансляции (PubMed:11154262). Связанные ссылки: PMID:9687510 PMID:9792677 PMID:11154262

• p38 регулирует оборот белков, фосфорилируя убиквитин-лигазу SIAH2 (PubMed:17003045) и ингибитор апоптоза CFLAR, а также может подавлять аутофагию, вмешиваясь в трафик ATG9 (PubMed:19893488). Связанные ссылки: PMID:17003045 PMID:19893488

• В динамике рецепторов p38 стимулирует клатрин-зависимую интернализацию EGFR посредством фосфорилирования самого EGFR и эффекторов RAB5A (PubMed:16932740), а также способствует отщеплению эктодомена лигандов семейства TGF-α, активируя металлопротеазу ADAM17 (PubMed:20188673). Связанные ссылки: PMID:16932740 PMID:20188673

• Ядерный p38 напрямую фосфорилирует факторы транскрипции, включая ATF1, ATF2, ATF6, ELK1, TP53/p53 и MEF2A/C (PubMed:10330143, PubMed:9430721, PubMed:9858528), и повышает доступность NF-κB на промоторах воспалительных генов за счет увеличения фосфорилирования гистона H3 по Ser-10. Связанные ссылки: PMID:10330143 PMID:9430721 PMID:98598528

• p38 участвует в регуляции клеточного цикла, фосфорилируя CDC25B/C, что приводит к задержке G2 после ультрафиолетового облучения (PubMed:11333986). Она также необходима для развития и стресс-индуцированного эритропоэза за счет регуляции экспрессии гена EPO (PubMed:10944042). Связанные ссылки: PMID:11333986 PMID:10943842

• Во время инфекции EsxA M. tuberculosis может активировать p38 в Т-клетках, что приводит к подавлению продукции IFN-γ (PubMed:21586573). Связанные ссылки: PMID:21586573

• p38 локализуется как в цитоплазме, так и в ядре. Она широко экспрессируется, с наивысшим уровнем в мозге, сердце, плаценте, поджелудочной железе и скелетных мышцах, и более низким уровнем в легких, печени и почках. Посттрансляционные модификации включают ацетилирование и убиквитинилирование; она идентифицирована в протеомных исследованиях.

Экспериментальные рекомендации и технические советы

• Иммуноген (аминокислоты 261–360 человеческого p38) консервативен у человека, мыши и крысы, что соответствует перекрестной реактивности антитела. Проверьте это с помощью выравнивания последовательностей перед распространением на другие виды.
• Для вестерн-блоттинга используйте денатурирующие восстанавливающие условия и начальный диапазон разведения антител 1:500–1:2000; оптимизируйте с использованием соответствующих положительных контролей (например, HeLa, Jurkat).
• Для IHC-P может потребоваться демаскировка антигена (например, цитратный буфер, pH 6.0); проверьте специфичность окрашивания с помощью блокирующего пептида или контроля ткани с нокаутом.
• Для IF/ICC фиксируйте 4% PFA и пермеабилизируйте 0,1% Triton X-100; выполните совместное окрашивание ядерными/цитоплазматическими маркерами.
• Для IP используйте 1–2 мкг антител на 500 мкг лизата белка и захватите с помощью бусинок Protein A/G.
• Для ELISA антитела могут использоваться в качестве реагента для захвата или детекции; протестируйте пару с соответствующим моноклональным антителом.

CamelBio: Ваш мост для комплексного снабжения

CamelBio снабжает производителей диагностических средств и исследовательские лаборатории широким спектром реагентов для IVD, включая валидированные антитела, нацеленные на пути стресса и воспаления, такие как p38 MAPK. Мы предлагаем односторонний доступ к парам антител, оптимизированным поликлональным и моноклональным антителам, вспомогательным реагентам оптом и индивидуальный поиск редких мишеней. Позвольте CamelBio поддержать разработку ваших анализов от концепции до клиники с помощью надежных материалов и технических знаний.