Поликлональные антитела Anti-OTOF для Вестерн-блоттинга (WB) и ИФА (ELISA) - Q9HC10

Основные спецификации и параметры продукта

Биологическое обоснование: функция и локализация отоферлина

• Отоферлин (белок, подобный Fer-1, 2) — это белок с несколькими изоформами; изоформы 1 и 3 экспрессируются в головном мозге взрослых, а изоформа 2 обнаруживается в плодах, а также в головном мозге взрослых, сердце, плаценте, скелетных мышцах и почках.
• Функционирует как ключевой кальциевый сенсор на ленточных синапсах внутренних волосковых клеток (IHC) улитки, запуская экзоцитоз синаптических везикул и высвобождение нейромедиаторов путем взаимодействия с пресинаптическими SNARE-белками кальций-зависимым образом.
• Также необходим для синаптического экзоцитоза в незрелых наружных волосковых клетках (OHC) и может играть роль в рециркуляции эндосом.
• Принадлежит к семейству белков ferlin, характеризующемуся наличием множественных C2-доменов, опосредующих кальций-зависимые взаимодействия с мембранами.
• Внутриклеточно локализуется в цитоплазматических везикулах, мембране синаптических везикул, базолатеральной клеточной мембране, мембране эндоплазматического ретикулума, мембране аппарата Гольджи, пресинаптической клеточной мембране, клеточной мембране и транс-сети Гольджи.
• Содержит трансмембранные области и сигнальный якорь, закрепляющие его на мембранах синаптических везикул и пресинаптической плазматической мембране.
• Связан с генетической глухотой: мутации вызывают аутосомно-рецессивную несиндромальную тугоухость (DFNB9) и спектральное расстройство слуховой нейропатии.
• Посттрансляционные модификации и структурные особенности включают связывание металлов, спиральные области и множественные C2-домены для связывания кальция, что имеет решающее значение для синаптической функции.

Экспериментальные рекомендации и технические советы

• Для Вестерн-блоттинга (WB), из-за большого размера белка (~227 кДа), используйте гели SDS-PAGE с низким процентом акриламида и увеличенное время переноса; проводите верификацию в соответствующих лизатах тканей человека (например, мозг, ткань улитки).
• Для ИФА (ELISA) область иммуногена (N-концевые 1-300) может использоваться для захвата или детекции отоферлина; рассмотрите возможность парирования с другим антителом, нацеленным на отличный эпитоп, для сэндвич-ИФА.
• Валидируйте специфичность антител в соответствующей системе образцов, так как экспрессия отоферлина является тканеспецифичной, а изоформы варьируются; лизаты мозга человека или трансфицированные клеточные линии подходят в качестве положительного контроля.
• Поскольку отоферлин является белком синаптических везикул, субклеточная фракцияция может обогатить сигнал в мембранных фракциях.

CamelBio: Ваш универсальный мост для закупок

CamelBio предоставляет комплексные закупки сырья для IVD, поддерживая производителей диагностических средств от концепции до клиники. Для исследований слуха и глухоты, связанных с отоферлином, CamelBio предлагает валидированные антитела, оптимизированные моноклональные/поликлональные антитела, вспомогательные реактивы оптом и поиск редких мишеней. Сотрудничайте с нами для оптимизации разработки анализов в области аудиторной нейронауки.