Поликлональное антитело против NSUN2 для вестерн-блоттинга, иммуногистохимии в парафиновых срезах, иммунофлуоресценции/иммуноцитохимии, ELISA - Q08J23

Основные спецификации и параметры продукта

Биологический контекст: Функция и локализация NSUN2

• NSUN2, также известный как MISU, MRT5, SAKI или TRM4, представляет собой РНК-цитозин-C(5)-метилтрансферазу, которая катализирует образование 5-метилцитозина (m5C) в различных типах РНК, включая тРНК, мРНК и длинные некодирующие РНК. Связанные ссылки: PMID:17071714 PMID:22995836 PMID:31199786
• Он метилирует определенные остатки цитозина в предшественниках тРНК: позиции 34 и 48 интрон-содержащей тРНК(Leu)(CAA) и позиции 48–50 тРНК(Gly)(GCC). Эта модификация необходима для стабильности тРНК и генерации тРНК-производных фрагментов. Связанные ссылки: PMID:17071714 PMID:22995836 PMID:31199786
• В мРНК опосредованное NSUN2 метилирование m5C рекрутирует белок YBX1, который связывается с модифицированными транскриптами и защищает их от деградации, тем самым повышая стабильность мРНК. Связанные ссылки: PMID:22395603 PMID:31358969 PMID:34556860
• Модификации m5C в мРНК также облегчают ядерный экспорт за счет распознавания адатерным белком ALYREF/THOC4, связывая метилирование с ядерно-цитоплазматическим транспортом транскриптов. Связанные ссылки: PMID:28418038
• NSUN2 метилирует некодирующие vault РНК (vtRNA), такие как VTRNA1.1, способствуя их процессингу в малые регуляторные РНК (svRNA4), которые контролируют дифференцировку эпидермиса. Связанные ссылки: PMID:23871666 PMID:31186410
• Он также нацеливается на митохондриальные тРНК для C5-метилирования, расширяя свою регуляторную роль до митохондриальной экспрессии генов. Связанные ссылки: PMID:31276587
• На субклеточном уровне NSUN2 обнаруживается в ядрышке, нуклеоплазме, цитоплазме, митохондриях и митотическом веретене, а также секретируется через экзосомы, что отражает его разнообразные функциональные компартменты.
• Экспрессируясь в мозге взрослых и плода, а также в лимфобластоидных клетках, NSUN2 ассоциирован с ключевыми процессами, такими как клеточный цикл, дифференцировка и сперматогенез; мутации связаны с умственной отсталостью.

Экспериментальные рекомендации и технические советы

• Для вестерн-блоттинга рекомендуется наносить 20–50 мкг общего белкового лизата; эндогенная полоса NSUN2 появляется приблизительно на уровне 86 кДа. Оптимизируйте блокирование и разведение первичного антитела для вашего образца.
• При иммуногистохимии (парафиновые срезы) рекомендуется термоиндуцированное восстановление антигена (например, цитратным буфером, pH 6.0); титруйте антитело для достижения специфического окрашивания.
• Для иммунофлуоресценции протестируйте фиксацию 4% параформальдегидом и пермеабилизацию 0.1% Triton X-100. Включайте соответствующие контроли для подтверждения локализации.
• Согласно данным поставщика, это антитело обладает перекрестной реактивностью с мышиным и крысиным белком NSUN2; валидируйте специфичность для интересующего вида и ткани, используя модели нокаута или нокдауна.
• Иммуноген охватывает аминокислоты 617–708 (C-концевой регион); учитывайте, что поликлональная сыворотка может распознавать несколько изоформ или продуктов деградации.
• Для применения в ELISA оптимизируйте концентрацию иммобилизованного антигена и разведение антитела, а также включайте лунки с отрицательным контролем для оценки фона.

CamelBio: Ваш мост к комплексным поставкам

CamelBio поддерживает производителей ИХА и исследовательские лаборатории, предлагая комплексный портфель сырья, включая это поликлональное антитело против NSUN2 для применения в исследованиях эпигенетики РНК и дифференцировки клеток. Наше предложение охватывает валидированные пары антител, рекомбинантные белки и вспомогательные реагенты, подкрепленные цепочкой поставок, которая учитывает все — от поиска редких мишеней до крупносерийного производства. Сотрудничайте с CamelBio, чтобы оптимизировать ваши закупки и ускорить переход от концепции к клиническому применению.