Кроличья поликлональная антитело против NPAS2 для Вестерн-блоттинга (WB), ИФ/ИЦК (IF/ICC), ИФА (ELISA) - Q99743

Основные спецификации и параметры продукта

Биологическое обоснование: функция и локализация NPAS2

• NPAS2 (нейрональный белок, содержащий PAS-домен 2), также известный как MOP4, bHLHe9 или PASD4, является транскрипционным фактором basic-helix-loop-helix-PAS, который образует основной компонент циркадных часов. Он функционирует как активатор транскрипции в положительной ветви петли обратной связи молекулярных часов.
• Белок гетеродимеризуется с BMAL1 (или BMAL2) и связывается с элементами E-box (5'-CACGTG-3') в промоторах генов, контролируемых часами, стимулируя ритмичную транскрипцию основных репрессоров часов (PER1/2/3, CRY1/2) и нижестоящих мишеней, участвующих в метаболизме, сне и других физиологических процессах.
• NPAS2 играет критическую роль в поддержании циркадного поведения при нормальных условиях света/темноты и кормления, а также в синхронизации пищевого поведения с запланированной доступностью пищи. Он также способствует гомеостазу сна и регуляции тревожного поведения посредством суточной модуляции экспрессии рецептора GABARA1 в мозге.
• Помимо центральных часов, NPAS2 регулирует транскрипцию генов в периферических тканях, таких как печень, контролируя ключевые метаболические пути. Он также участвует в реакции на повреждение ДНК, регулируя гены клеточного цикла и репарации ДНК.
• Гетеродимер NPAS2-BMAL1 участвует во вторичной петле обратной связи, активируя ядерные рецепторы NR1D1/2 и RORA/B/G, которые в свою очередь подавляют и активируют транскрипцию BMAL1 соответственно, способствуя устойчивости циркадных ритмов.
• На внутриклеточном уровне NPAS2 локализуется в ядре, что согласуется с его ролью транскрипционного фактора. Он содержит гем-связывающие PAS-домены, и связывание гема может влиять на его активность.
• Посттрансляционные модификации и взаимодействия белков являются ключевыми для определения циркадного периода, а нарушения ритмов, опосредованных NPAS2, связаны с сердечно-сосудистыми заболеваниями, раком, метаболическим синдромом и старением.
• Белок экспрессируется повсеместно, с заметными ролями в супрахиазматическом ядре (SCN) мозга (центральные часы) и в периферических осцилляторах.

Экспериментальное руководство и технические советы

• Иммуноген для этого кроличьего поликлонального антитела соответствует последовательности в пределах аминокислот 45–240 человеческого NPAS2 (NP_002509.2), области, охватывающей часть N-концевого домена bHLH и первый PAS-домен. Эта конструкция может обеспечивать реактивность к нативным и денатурированным формам.
• Для Вестерн-блоттинга ожидается полоса около 92 кДа. Рекомендуется использовать восстанавливающие условия и стандартные протоколы SDS-PAGE. Поскольку NPAS2 претерпевает циркадные циклы, время сбора образцов должно быть строго контролируемым для фиксации оптимальной экспрессии.
• При выполнении иммунофлуоресценции/иммуноцитохимии NPAS2 обычно демонстрирует ядерную локализацию. Методы фиксации и пермеабилизации должны быть оптимизированы для ядерных мишеней, а совместное окрашивание ядерным маркером может подтвердить специфичность.
• В применениях ИФА (ELISA) провалидируйте антитело в соответствующей системе образцов и включите соответствующие контроли для оценки фона. Поликлональные антитела могут проявлять изменчивость между партиями, поэтому рекомендуется постоянный отслеживание серий.
• Сообщается о перекрестной реактивности с NPAS2 мыши и крысы; однако рекомендуется выравнивание последовательности области иммуногена для оценки реактивности в других видах. Для каждого нового вида или применения необходима эмпирическая валидация.

CamelBio: Ваш мост для комплексного снабжения

CamelBio поддерживает производителей диагностических средств, ядровые лаборатории и научно-исследовательские институты комплексными поставками сырья для IVD. Для исследований циркадной биологии и транскрипционных факторов мы предоставляем это кроличье поликлональное антитело против NPAS2 вместе с валидированными парами антител, оптимизированными моноклональными/поликлональными антителами и вспомогательными реактивами оптом. Наши услуги по поиску поставщиков также охватывают закупку сырья для редких мишеней, обеспечивая беспрепятственный путь от концепции до клиники.