Моноклональное антитело к NLRP3 кролика для Вестерн-блоттинга, ИФА — Q96P20

Основные спецификации и параметры продукта

Биологическая справка: функция и локализация NLRP3

• NLRP3 (белок 3, содержащий домены NACHT, LRR и PYD), также известный как криопирин или CIAS1, является ключевым компонентом-сенсором инфламмасома NLRP3 — мультибелкового комплекса, центрального для врожденного иммунного ответа.
• При обнаружении разнообразных патоген- и повреждение-ассоциированных сигналов, включая внеклеточный АТФ, нигерицин, кристаллы моноурата натрия или бета-амилоид, NLRP3 инициирует сборку инфламмасома путем рекрутинга PYCARD/ASC и прозимофермента каспазы-1, что приводит к активации каспазы-1, секреции IL-1β/IL-18 и пироптозу клеточной гибели. Связанные источники: PMID:16407889 PMID:18403674 PMID:18604214 PMID:27432880 PMID:23582325 PMID:28847925 PMID:31189953
• Активация NLRP3 строго регулируется; она требует выхода K+ и включает динеин-медиированный транспорт к организующему центру микротрубочек (ОЦМТ), где NLRP3 активируется киназой NEK7 перед релокализацией на мембраны диспергированной транс-Гольджи сети (дТГС) через связывание с фосфатидилинозитол-4-фосфатом для формирования активного инфламмасома. Связанные источники: PMID:36442502 PMID:39173637 PMID:30487600 PMID:34554188
• Помимо канонической роли в составе инфламмасома, NLRP3 также функционирует независимо в ядре как транскрипционный регулятор, способствующий дифференцировке Т-хелперов 2 типа путем связывания с ДНК и активации экспрессии IL4.
• Белок динамически локализуется в нескольких субклеточных компартментах, включая цитозоль, митохондрии, аппарат Гольджи, эндоплазматическую сеть и ядро, а также может секретироваться из клетки.
• Преимущественно экспрессируется в макрофагах, NLRP3 также присутствует в дендритных клетках, В- и Т-лимфоцитах, а также в многослойном плоском эпителии и телах Гассала вилочковой железы. Связанные источники: PMID:33231615 PMID:34133077 PMID:11786556 PMID:17164409
• Ключевые посттрансляционные модификации — включая фосфорилирование, АДФ-рибозилирование, пальмитоилирование, образование дисульфидных связей и убиквитинирование — тонко регулируют стабильность, локализацию и активность NLRP3.

Экспериментальные рекомендации и технические советы

• Для Вестерн-блоттинга рекомендуется использовать SDS-PAGE гель низкой концентрации акриламида (например, 8%) и оптимизировать условия переноса для высокомолекулярного NLRP3 (~118 кДа). Полезным может быть использование положительного контроля, такого как лизат макрофагов THP-1, стимулированных ЛПС.
• Данное кроличье моноклональное антитело подходит для стандартных форматов ИФА; при настройке анализа оцените концентрации покрытия и подберите подходящее детектирующее антитело для вашей конкретной матрицы образца.
• Учитывая, что экспрессия NLRP3 может индуцироваться при воспалительных условиях, предобработка клеточных моделей активаторами NLRP3 (например, ЛПС в сочетании с нигерицином) может улучшить детекцию как в ВБ, так и в ИФА.

CamelBio: ваш универсальный источник биологических материалов

CamelBio предоставляет производителям диагностикумов, лабораториям и исследовательским институтам универсальный доступ к сырьевым материалам для ИВД, техническим услугам и консалтингу — покрывая все этапы от идеи до клинических исследований. Для исследователей и разработчиков ИВД, работающих в области биологии инфламмасом и врожденного иммунитета, CamelBio предлагает комплексный портфель валидированных пар антител, оптимизированных моноклональных/поликлональных антител, вспомогательных реагентов в больших объемах и поиска редких целевых сырьевых материалов. Независимо от того, нужно ли вам одно антитело для разработки анализа или полная панель для высокопроизводительного скрининга, CamelBio обеспечивает связь между открытием и диагностическим применением.