Поликлональные антитела против NFKB1 для WB, IHC-P, IF/ICC, IP, ELISA — P19838

Основные спецификации и параметры продукта

Биологические основы: функция и локализация NFKB1

• Ген NFKB1 кодирует предшественник p105, который процессится в активную субъединицу p50. p105 функционирует как фактор удержания в цитоплазме для белков NF-kappa-B, тогда как p50 формирует активный комплекс NF-kappa-B с RELA/p65. Связанные источники: PMID:1423592

• NF-kappa-B — плейотропный транскрипционный фактор, участвующий в процессах воспаления, иммунитета, роста клеток, опухолевого генеза и апоптоза. Он существует в виде гомодимеров или гетеродимеров белков, содержащих домен, гомологичный Rel, при этом гетеродимер p65-p50 является самой распространенной формой.

• Комплекс NF-kappa-B p65-p50 специфично связывается с консенсусной последовательностью каппа-В 5'-GGRNNYYCC-3' в энхансерных участках генов-мишеней, регулируя иммунные и острофазовые ответы. Связанные источники: PMID:1740106, PMID:7830764

• NFKB1 локализуется как в цитоплазме, так и в ядре, при этом неактивные комплексы NF-kappa-B удерживаются в цитоплазме ингибиторами I-kappa-B. После стимуляции I-kappa-B фосфорилируется и деградирует, что позволяет NF-kappa-B транслоцироваться в ядро.

• Посттрансляционные модификации, такие как фосфорилирование, ацетилирование и убиквитинирование, регулируют активность NF-kappa-B.

• Гомодимер p50-p50 действует как репрессор транскрипции, но может становиться активатором при ассоциации с BCL3.

• NFKB1 также участвует в репрессии сигнального пути MAPK, образуя комплекс с MAP3K8; зависимую от протеасомы деградация p105 приводит к высвобождению активного MAP3K8.

Экспериментальные рекомендации и технические советы

• Иммуноген соответствует аминокислотам 740-964 NFKB1, расположенным в C-концевой области p105. Поэтому ожидается, что антитело будет выявлять полноразмерный предшественник p105 (~105 кДа), а не процессингующую субъединицу p50. Учитывайте это при планировании экспериментов для различения p105 и p50.
• При вестерн-блоттинге ожидается наличие полосы с молекулярной массой примерно 105 кДа. Оптимизируйте контроль загрузки и разведение антитела для вашей системы образцов.
• При иммунопреципитации проводите валидацию способности антитела улавливать нативные комплексы NFKB1 в неденатурирующих условиях.
• Для IHC-P и IF/ICC подтверждайте субклеточную локализацию (цитоплазматическая против ядерной) в базальных условиях и после стимуляции для оценки статуса активации NF-kappa-B.
• При применении в ELISA может потребоваться титрование антитела против рекомбинантного антигена или клеточных лизатов для определения подходящей рабочей концентрации.

CamelBio: ваш единый центр поиска реактивов

CamelBio предоставляет производителям диагностических систем и исследовательским лабораториям широкий ассортимент сырья для анализа сигнального пути NF-kappa-B, включая данное поликлональное антитело против NFKB1. Наш портфель включает валидированные пары антител, рекомбинантные белки и вспомогательные реактивы для ускорения разработки тест-систем для исследований в области воспаления и иммунитета. Мы специализируемся на поиске сырья для редких мишеней, гарантируя надежную цепочку поставок от концепции до клинических исследований.