Моноклональное антитело против NF-κB2 для ВБ, ИГГ-П, ИФА — Q00653

Основные технические характеристики и параметры продукта

Биологическая справка: Функция и локализация NF-κB2

• Ген NF-κB2 кодирует субъединицу p100, которая подвергается протеолитической обработке с образованием активной ДНК-связывающей субъединицы p52; изоформа p49 также образуется в результате альтернативного сплайсинга.
• p100/p52 относится к семейству транскрипционных факторов NF-каппа-B, образует гомо- или гетеродимеры с белками семейства Rel (RELA, RELB, REL, NFKB1) для регуляции экспрессии генов.
• В неканоническом пути сигналинга NF-каппа-B связанный с RelB p100 фосфорилируется IKKα и обрабатывается до p52, что приводит к транслокации в ядро транскрипционного активаторного комплекса RelB-p52.
• Гомодимеры p52 действуют как транскрипционные репрессоры, тогда как гетеродимеры RelB-p52 активируют транскрипцию, связываясь с каппа-B сайтами (5'-GGRNNYYCC-3') в промоторах генов иммунной системы и генов, связанных с воспалением.
• NF-κB2 участвует в широком спектре биологических процессов, включая воспаление, иммунитет, рост клеток, дифференцировку и апоптоз.
• Совместно с RELB NF-κB2 регулирует циркадные ритмы, подавляя транскрипционную активность гетеродимера CLOCK-BMAL1.
• Субклеточная локализация: как цитоплазматическая (в виде неактивных комплексов p100/I-каппа-B), так и ядерная (в виде активных димеров, содержащих p52).
• Анкириновые повторы, изопептидная связь и уб-конъюгация (SUMOилирование) относятся к посттрансляционным модификациям; белок также подвергается фосфорилированию.

Экспериментальные рекомендации и технические советы

• Иммуноген соответствует аминокислотам 745–877 в С-концевом домене анкириновых повторов p100, который отсутствует у обработанной субъединицы p52; поэтому антитело может преимущественно распознавать полноразмерный p100 (~97 кДа). При необходимости рекомендуем валидировать реактивность как в отношении p100, так и p52 в вашей модельной системе.
• Для вестерн-блоттинга используйте стандартные условия электрофореза в ПААГ с додецилсульфатом натрия и переноса на мембрану; для p100 ожидается полоса в области около 97 кДа. Полосы с меньшей молекулярной массой могут представлять собой промежуточные продукты процессинга или продукты деградации.
• При иммуногистохимии на парафиновых срезах (ИГГ-П) может наблюдаться как ядерное, так и цитоплазматическое окрашивание в зависимости от статуса активации NF-κB2 в ткани. Для подтверждения специфичности сигнала включите соответствующие контроли.
• В ИФА антитело можно использовать с рекомбинантным p100 или лизатами клеток; убедитесь, что иммобилизованный антиген содержит область С-концевого эпитопа.
• Перекрестная реактивность с мышью и крысой указывает на консервативность иммуногенной последовательности у этих видов, однако для подтверждения идентичности эпитопа рекомендуется провести выравнивание последовательностей.

CamelBio: ваш единый центр поиска сырья

CamelBio предоставляет производителям диагностических систем и исследовательским лабораториям комплексные услуги по поиску сырья для ИВД, техническую поддержку и консультации — от идеи до клинических исследований. Для NF-κB2 и других мишеней пути сигналинга NF-каппа-B поставщики на платформе CamelBio могут предоставить валидированные пары антител, оптимизированные моноклональные и поликлональные антитела, крупные партии вспомогательных реагентов, а также помощь в закупке сырья для редких мишеней.