Моноклональное антитело к NF-kB p65/RelA для WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA, ChIP - Q04206

Основные спецификации и параметры продукта

Биологический контекст: функция и локализация NF-kB p65/RelA

• Субъединица NF-kB p65 (также известная как RELA, NFKB3) является ключевым компонентом транскрипционного факторного комплекса NF-kappa-B, плейотропного регулятора, присутствующего практически во всех типах клеток.
• Комплексы NF-kappa-B представляют собой гомо- или гетеродимеры, образованные белками, содержащими REL-подобный домен; гетеродимер RELA и NFKB1 (p50) является наиболее распространенной формой и действует как транскрипционный активатор.
• RELA/p65 играет центральную роль в воспалительных и иммунных ответах, а также в дифференцировке, пролиферации, апоптозе и опухолеобразовании клеток, связываясь с каппа-B-сайтами в промоторах генов-мишеней.
• В нестимулированных клетках димеры NF-kappa-B удерживаются в цитоплазме ингибиторами (I-kappa-B); при активации I-kappa-B фосфорилируется и деградирует, что позволяет RELA транслоцироваться в ядро для регуляции экспрессии генов.
• RELA подвергается обширным посттрансляционным модификациям, включая ацетилирование, фосфорилирование, метилирование, S-нитрозилирование и убиквитинирование, которые тонко регулируют его активность, стабильность и взаимодействия.
• RELA необходим для экспрессии генов цитокинов в Т-клетках, что было продемонстрировано в функциональных исследованиях. Связанные ссылки: PMID:15790681
• RELA был идентифицирован как ключевой транскрипционный фактор, регулирующий интерфероновый ответ во время инфекции SARS-CoV-2. Связанные ссылки: PMID:33440148
• Белок локализуется преимущественно в ядре и цитоплазме, с динамическим перемещением между этими компартментами в зависимости от статуса активации.

Экспериментальные рекомендации и технические советы

• Для вестерн-блоттинга (WB) ожидается специфичная полоса около 60 кДа, что соответствует расчетной молекулярной массе NF-kB p65.
• Для IHC-P и IF/ICC рекомендуется валидация в соответствующей ткани или клеточной системе; для парафиновых срезов может потребоваться антигенное демонскирование.
• Данные валидации методом нокаута (KO) указывают на специфичность к эндогенному RELA; пользователям рекомендуется включать в эксперименты соответствующие контроли (например, лизаты нокаутных клеток).
• В анализах ChIP антитело распознает нативный NF-kB p65, связанный с хроматином; оптимальные условия фиксации и фрагментации следует определять эмпирически.
• Хотя антитело указано для множества применений, условия для каждого конкретного анализа (например, разведение, время инкубации) следует оптимизировать в лаборатории конечного пользователя.

CamelBio: Ваш мост для комплексных поставок

CamelBio выступает в качестве комплексного партнера по поставкам сырья для IVD, предлагая производителям диагностических систем и исследовательским институтам валидированные пары антител, оптимизированные моноклональные/поликлональные антитела и вспомогательные реагенты в больших объемах. Наши возможности поставок охватывают ключевые мишени, такие как NF-kB p65, для поддержки разработки анализов в области воспаления, онкологии и инфекционных заболеваний. От концепции до клиники CamelBio обеспечивает единый доступ к источникам сырья для редких мишеней, подкрепленный технической экспертизой.