Кроличья поликлональная антитела против NDST1 для Вестерн-блоттинга, ИФА - P52848

Основные характеристики и параметры продукта

Биологический контекст: Функция и локализация NDST1

• NDST1 — это важнейший бифункциональный фермент, который инициирует модификацию гепарансульфата, последовательно катализируя N-деацетилирование и N-сульфатирование остатков глюкозамина, продуцируя N-сульфатированный гепарозан, необходимый для последующего биосинтеза гепарина и гепарансульфата. Связанные ссылки: PMID:35137078, PMID:9230113, PMID:9744796
• Этот ферментативный этап является лимитирующим и определяет окончательный паттерн сульфатирования гепарансульфата, который, в свою очередь, определяет его способность взаимодействовать с белками, такими как L-селектин, тем самым участвуя в адгезии и трафике воспалительных клеток.
• Активность NDST1 необходима для экзосомальной секреции синдecана, SDCBP (синтенина) и CD63, что подчеркивает ее неканоническую функцию в биогенезе или высвобождении внеклеточных везикул. Связанные ссылки: PMID:22660413
• Альтернативно сплайсированный изоформ (изоформа 2) лишен обеих каталитических активностей и функционирует как доминантно-негативный регулятор, возможно, за счет изменения стехиометрии биосинтетических ферментных комплексов.
• На субклеточном уровне NDST1 является интегральным мембранным белком аппарата Гольджи с двойной локализацией в мембранах цис-Гольджи и транс-Гольджи сети.
• Белок широко экспрессируется в различных тканях, но особенно обилен в сердце, печени и поджелудочной железе, что соответствует органам, требующим интенсивного биосинтеза гепарансульфата.
• NDST1 подвергается гликозилированию и образованию дисульфидных связей; мутации в гене NDST1 связаны с умственной отсталостью, подчеркивая его критическую роль в развитии.

Экспериментальные рекомендации и технические советы

• Иммуноген (а.о. 40–170) охватывает N-концевую область, общую для изоформы 1 и доминантно-негативной изоформы 2; таким образом, антитело может распознавать оба сплайс-варианта, и его следует валидировать в соответствующей системе образцов.
• При Вестерн-блоттинге зрелый белок NDST1 мигрирует с кажущейся молекулярной массой ~101 кДа; сдвиги полос или множественные полосы могут возникать из-за гликозилирования или комплексов с дисульфидными связями, поэтому рекомендуется использовать восстанавливающие условия и соответствующие положительные контроли.
• Для ИФА эти поликлональные антитела могут служить в качестве улавливающего или детектирующего реагента; конечным пользователям следует проводить титрование по шахматной схеме со своим специфическим целевым антигеном (рекомбинантный белок или клеточный лизат) для оптимизации работы.
• Поскольку заявлена перекрестная реактивность с мышиным NDST1, антитело подходит для исследований на мышах; тем не менее, рекомендуется подтвердить консервативность эпитопа с помощью выравнивания последовательностей и пилотных экспериментов на образцах мышиного происхождения.

CamelBio: Ваш мост к единому источнику поставок

CamelBio поддерживает производителей диагностических средств и исследовательские лаборатории, предоставляя единый доступ к высококачественным сырьевым материалам для ИВД, включая валидированные пары антител, оптимизированные поликлональные и моноклональные антитела, а также вспомогательные реагенты оптом. Разрабатываете ли вы анализы, сфокусированные на метаболизме гепарансульфата, воспалении или биологии внеклеточных везикул, наши кроличьи pAb против NDST1 служат надежным реагентом для применения в Вестерн-блоттинге и ИФА. Благодаря нашему экспертному техническому консультированию и возможностям поиска редких мишеней, CamelBio готов ускорить ваш проект от концепции до клиники.