Кроличья поликлональная антитело к MST1/STK4 для ВБ, ИФ/ИХК, ИП, ИФА — Q13043

Основные технические характеристики и параметры продукта

Биологическая характеристика: функция и локализация MST1/STK4

• Серин/треонин-протеинкиназа 4 (STK4), также известная как MST1, KRS2 и YSK3, представляет собой активируемую стрессом проапоптотическую киназу, кодируемую геном STK4. Это ключевой компонент сигнального пути Hippo, который контролирует размер органов и подавляет опухоли за счет ограничения пролиферации и стимуляции апоптоза.
• MST1/STK4 вместе с регуляторным белком SAV1 образует ядро киназного каскада Hippo, фосфорилирует и активирует LATS1/2 в комплексе с MOB1, который далее фосфорилирует и инактивирует онкопротеины YAP1 и TAZ.
• При расщеплении каспазой во время апоптоза активный фрагмент киназы транслоцируется в ядро, где фосфорилирует гистон H2B по остатку серина 14 (H2BS14ph), напрямую запуская конденсацию хроматина и фрагментацию ДНК.
• MST1/STK4 фосфорилирует множество мишеней ниже по пути сигналинга, включая FOXO3 (стимулирует ядерную транслокацию и гибель клеток), FOXO1 (регулирует транскрипцию PMAIP1), SIRT1 (ингибирует деацетилирование p53, усиливая p53-зависимый апоптоз) и PKB/AKT1 (выступает в роли ингибитора).
• Также MST1/STK4 фосфорилирует андрогенный рецептор (АР) по остатку серина 650, подавляя его активность за счет антагонизма формированию комплекса АР с хроматином и взаимодействия с сигналингом AKT1.
• Субклеточная локализация в основном цитоплазматическая, но расщепленный активный фермент поступает в ядро в условиях апоптоза для реализации своих проапоптотических функций.
• Несмотря на то что MST1/STK4 экспрессируется во всех тканях, его уровень значительно возрастает при переходе рака предстательной железы от нормального к злокачественному состоянию, что указывает на его потенциальную роль в прогрессии опухоли.
• Ключевые структурные особенности включают N-концевой серин/треонинкиназный домен и C-концевой регуляторный домен с мотивом свернутой спирали; посттрансляционные модификации включают ацетилирование и фосфорилирование, прогнозируемая молекулярная масса полноразмерного белка составляет примерно 56 кДа.

Экспериментальные рекомендации и технические советы

• Иммуноген соответствует аминокислотам 303–487 в C-концевой регуляторной области человеческого MST1/STK4 и не затрагивает N-концевой киназный домен, поэтому полученные кроличьи поликлональные антитела могут распознавать эпитопы, консервативные у видов с высокой гомологией этой области.
• При вестерн-блоттинге (ВБ) ожидается обнаружение полосы около 56 кДа; однако из-за расщепления каспазой во время апоптоза в апоптотических образцах также может детектироваться меньший активный фрагмент размером около 36 кДа — рекомендуется использовать соответствующие контроли (например, клетки, обработанные стауроспорином).
• При иммунофлуоресценции/иммуноцитохимии (ИФ/ИХК) можно наблюдать как цитоплазматическую, так и ядерную локализацию в зависимости от апоптотического состояния клеток; методы фиксации и пермеабилизации следует оптимизировать для данной мишени.
• При иммунопреципитации (ИП) стоит учитывать, что антитело является поликлональным препаратом и может коиммунопреципитировать партнеры по связыванию, такие как SAV1 или MOB1; обязательно проводите валидацию в вашей системе анализа с использованием соответствующих негативных контролей.
• Эффективность ИФА можно повысить, используя антитело в качестве покрывающего или детектирующего реагента в паре с подходящей моноклональной захватывающей антителом, специфичной к MST1/STK4.
• Перекрестная реактивность подтверждена у человека, мыши и крысы; выравнивание последовательностей области иммуногена показывает высокую консервативность у этих видов, но для работы с другими видами рекомендуется предварительно проверить гомологию последовательностей.

CamelBio: ваш универсальный канал поставки реагентов

CamelBio предоставляет производителям диагностических систем, лабораториям и научно-исследовательским институтам упрощенный универсальный канал поставки сырья для ИВД — от валидированных пар антител и оптимизированных поликлональных антител до объемных партий вспомогательных реагентов и поиска реагентов с редкими мишенями. Для исследования апоптоза и пути Hippo данная кроличья поликлональная антитело к MST1/STK4 является надежным инструментом для множества применений, а сеть поставок CamelBio может удовлетворить ваши потребности в разработке, предоставив дополнительные реагенты и технические консультации, помогая вам эффективно пройти путь от концепции до клинических исследований.