Моноклональное антитело против мышиного IgM для вестерн-блоттинга, ИГХ-П, проточной цитометрии, ИФА - P01872

Основные спецификации и параметры продукта

Биологический контекст: Функция и локализация константного региона IgM

• Идентичность белка и изоформы: Мишенью является иммуноглобулиновая тяжелая константная мю-цепь (Ig mu chain), кодируемая геном Ighm (также известным как Igh-6). Она составляет константный регион антител IgM и существует как в секретируемой (sIgM), так и в мембраносвязанной (mIgM) изоформах благодаря альтернативному сплайсингу.
• Связывание антигена и сборка вариабельных доменов: В гуморальном иммунитете вариабельные домены одной тяжелой и одной легкой цепи формируют сайт связывания антигена. Эти домены собираются в результате V-(D)-J перестройки и подвергаются соматической гипермутации для аффинного созревания после контакта с антигеном (по сходству).
• Мультимеризация секретируемого IgM и полиреактивность: sIgM мультимеризуется в пентамеры или гексамеры для высокоавидного связывания антигена. Нативный sIgM является полиреактивным, распознавая консервативные структуры собственного организма и патогенов, тогда как иммунный sIgM является антиген-специфичным; оба типа необходимы для эффективного гуморального ответа. Связанные ссылки: PMID:10899913 PMID:28135254 PMID:34788614
• Эффекторные функции через Fc-рецепторы и комплемент: Эффекторные функции sIgM осуществляются через высокоаффинный Fc-рецептор FCMR на лимфоидных клетках, способствуя IgG-ответу и самотолерантности, а также путем рекрутирования C1q для активации классического пути комплемента, что облегчает нейтрализацию патогенов и фагоцитоз апоптотических клеток. Связанные ссылки: PMID:10899913 PMID:11062505 PMID:28135254
• Мукональный иммунитет и трансцитоз: На слизистых поверхностях sIgM транспортируется через эпителий с помощью PIGR и секретируется вместе с секреторным компонентом. Комплексы IgM-антиген могут подвергаться обратному трансцитозу через FCMR через M-клетки в лимфоидные ткани. Связанные ссылки: PMID:34788614
• Сигналинг через мембраносвязанный IgM (BCR): Будучи частью комплекса B-клеточного рецептора, мембраносвязанный IgM обеспечивает конститутивный тонический сигналинг, необходимый для выживания B-клеток, и опосредует сигналинг через пре-ВКР, который регулирует перестройку генов иммуноглобулинов и аллельное исключение.
• Субклеточная локализация и экспрессия в тканях: Белок локализован на клеточной мембране (как компонент BCR) и секретируется. Экспрессируется на уровне белка в костном мозге, а также в B-1 и B-2 клетках.
• Посттрансляционные модификации и ключевые слова по структуре: Характеризуется дисульфидными связями, N-гликозилированием, иммуноглобулиновыми доменами и трансмембранным спиральным участком (в мембраносвязанной изоформе). Ключевые слова: дисульфидная связь, гликопротеин, иммуноглобулиновый домен, мембрана, секретируемый, трансмембранный.

Экспериментальные рекомендации и технические советы

• Использованный иммуноген представляет собой рекомбинантный фьюжн-белок, охватывающий аминокислоты 105-454 мышиного Ighm (P01872), что соответствует области внутри константного домена. Такая конструкция может нацеливаться на эпитопы, консервативные между секретируемой и мембраносвязанной изоформами, потенциально позволяя детектировать обе формы.
• Для вестерн-блоттинга (WB) прогнозируемая молекулярная масса мишени составляет приблизительно 50–53 кДа в восстановительных условиях. Рекомендуется использовать соответствующие контроли, такие как лизаты селезенки мыши или очищенный IgM, и валидировать картину полос в вашей системе образцов.
• При иммуногистохимии парафиновых срезов (ИГХ-П) оптимальные условия демаскировки антигена и разведение антитела должны быть определены экспериментально. Антитело предназначено для использования на мышиных тканях; перекрестная реактивность с другими видами не зарегистрирована.
• Для проточной цитометрии (FC) обеспечьте надлежащий блокинг Fc-рецепторов и используйте непосредственно конъюгированные или вторичные детектирующие реагенты, совместимые с форматом кроличьего моноклонального антитела. Рекомендуется предварительная валидация окрашивания на популяциях мышиных B-лимфоцитов (например, спленоцитах).
• В применениях ИФА данное антитело может использоваться для захвата или детекции мышиного IgM. Для сэндвич-ИФА рекомендуется подобрать соответствующее детектирующее антитело и валидировать чувствительность и специфичность анализа.

CamelBio: Ваш мост для комплексных поставок

Будучи преданным партнером по сырью для ИВД, CamelBio предлагает комплексный портфель антител, антигенов и вспомогательных реагентов для поддержки разработчиков диагностических систем и исследователей. Это антимышиное IgM моноклональное антитело, нацеленное на константный регион мю-тяжелой цепи, служит ключевым инструментом для исследований гуморального иммунитета, фенотипирования B-клеток и анализов количественного определения IgM. От валидированных пар антител до поставок реагентов оптом, CamelBio оптимизирует ваш рабочий процесс поставок от концепции до клиники.