Моноклональное антитело Anti-Mouse CD45R/B220 (биотинилированное) для проточной цитометрии — P06800 / P08575

Основные характеристики и параметры продукта

Биологический фон: функция и локализация CD45R/B220

• CD45R/B220, кодируемый геном Ptprc, представляет собой изоформу рецептороподобной тирозиновой протеинфосфатазы C, также известной как общий лейкоцитарный антиген (L-CA), лимфоцитарный антиген 5 (Ly-5) или T200. Это трансмембранный гликопротеин, преимущественно экспрессируемый на гемопоэтических клетках.
• Белок является ключевым регулятором активации T-клеток и при связывании с DPP4 действует как положительная костимулирующая молекула. Он содержит два расположенных последовательно внутриклеточных домена PTPase; первый обладает ферментативной активностью, тогда как второй регулирует специфичность к субстратам.
• После активации T-клеточного рецептора CD45 рекрутирует и дефосфорилирует сигнальные молекулы, такие как SKAP1, FYN и LYN, тем самым точно настраивая порог активации и предотвращая аутореактивность.
• CD45 взаимодействует с CLEC10A на антигенпрезентирующих клетках в иммунологическом синапсе; это взаимодействие на незрелых дендритных клетках распознаёт CD45, несущий антиген Tn, на эффекторных T-клетках и способствует периферической толерантности.
• Изоформа B220 образуется в результате альтернативного сплайсинга и преимущественно экспрессируется на B-лимфоцитах и некоторых активированных T-клетках, являясь классическим пан-B-клеточным маркером у мышей.
• На субклеточном уровне CD45 локализуется на клеточной мембране, в мембранных рафтах и иммунологическом синапсе, где его кластеризация и исключение из сигнальных микродоменов влияют на его активность.
• Посттрансляционные модификации включают обширное N- и O-связанное гликозилирование, которое влияет на конформацию белка и его взаимодействие с лигандами.
• Расчётная молекулярная масса белка мыши составляет ~144 кДа, однако гликозилирование и вариации изоформ приводят к появлению наблюдаемых полос в диапазоне от 130 до 144 кДа.

Экспериментальные рекомендации и технические советы

• Для проточной цитометрии проведите титрование биотинилированного антитела, чтобы определить оптимальную концентрацию для вашей конкретной клеточной популяции. Включите соответствующие изотипические контроли и при необходимости обеспечьте блокирование Fc-рецепторов.
• Поскольку антитело является биотинилированным, для детекции необходим вторичный реагент — стрептавидин или авидин, конъюгированный с флуорофором. Выбирайте конъюгат стрептавидина с минимальной перекрёстной реактивностью по отношению к виду, из которого получен образец.
• Проверьте специфичность окрашивания на известных CD45R/B220-положительных и CD45R/B220-отрицательных клеточных линиях (например, на спленоцитах мыши или B-клеточных линиях), чтобы подтвердить эффективность.
• Для многокрасочных панелей проверьте спектральное перекрытие и используйте компенсационные контроли с окрашиванием одним флуорофором.
• После валидации антитело также может применяться в других методах, однако в первую очередь оно оптимизировано для проточной цитометрии.

CamelBio: ваш универсальный партнёр по поиску поставщиков

CamelBio выступает комплексным партнёром по поиску сырья для IVD, предлагая валидированные пары антител, оптимизированные моноклональные и поликлональные антитела, вспомогательные реагенты в больших объёмах и поиск редкого сырья для мишеней. Для исследователей, занимающихся биологией лимфоцитов и передачей сигналов в T-клетках, наш ассортимент включает высококачественные антитела, такие как данный клон anti-CD45R/B220, поддерживая иммунофенотипирование методом проточной цитометрии и разработку диагностических тестов.