Антимышшиная моноклональная антитело против CD4 (APC/Цианин7) для проточной цитометрии - P06332

Основные технические характеристики и параметры продукта

Биологическая справка: функция и локализация CD4

• Ген Cd4 кодирует поверхностный гликопротеин Т-клеток CD4 — это одно проходной мембранный белок типа I с четырьмя внеклеточными иммуноглобулиноподобными доменами, трансмембранной спиралью и коротким цитоплазматическим хвостом. Мышиный белок, также известный как L3T4 или Ly-4, имеет такую же архитектуру и играет центральную роль в адаптивном иммунитете.
• CD4 выполняет функцию корецептора для молекул MHC класса II. На Т-хелперах он связывается с тем же МНС-пептидным комплексом, который распознается Т-клеточным рецептором (TCR), тем самым повышая общую аффинность взаимодействия и облегчая активацию Т-клеток.
• После связывания с МНС CD4 рекрутирует киназу семейства Src LCK в комплекс TCR-CD3. Это запускает каскады фосфорилирования, которые приводят к продукции лимфокинов, подвижности Т-клеток, адгезии и полной активации Т-хелперов.
• CD4 необходим для развития Т-хелперов в тимусе и дифференцировки моноцитов в функциональные макрофаги. Он также участвует в активации и экспрессии цитокинов в макрофагах, дендритных клетках и NK-клетках, часто независимо от TCR/LCK.
• Субклеточно CD4 преимущественно локализован на клеточной мембране, где он ассоциируется с липидными рафтами и подвергается посттрансляционным модификациям, включая пальмитоилирование, N-связанное гликозилирование и фосфорилирование. Эти модификации регулируют его мембранную локализацию и сигнальные функции.
• Тканевая специфичность у мышей: высокоэкспрессирован на Т-хелперах, также присутствует в более низких концентрациях на макрофагах, дендритных клетках и NK-клетках. Его экспрессия является отличительным признаком линии Т-хелперов.
• Белок относится к иммуноглобулиновой суперсемейству и содержит несколько дисульфидных связей — эти особенности обеспечивают его структурную стабильность и способность взаимодействовать с лигандами.

Экспериментальные рекомендации и технические советы

• Поскольку иммуногеном служит рекомбинантный белок, антитело может распознавать линейный эпитоп; учитывайте это при проведении демаскировки антигена или денатурирующих вестерн-блотов, хотя данное антитело рекомендовано для неденатурирующей проточной цитометрии.
• Для проточной цитометрии титруйте антитело для определения оптимальной концентрации для вашей популяции клеток, а также используйте соответствующие контроля изотипа и однокрасочные компенсационные контроля при работе с флуоресценцией APC/Цианин7.
• Подготовьте суспензию одиночных клеток из лимфоидных органов (селезенка, лимфатические узлы, тимус) или периферической крови, и блокируйте Fc-рецепторы для минимизации неспецифического связывания перед окрашиванием.
• Проверяйте экспрессию в соответствующем штамме мышей и ткани; учтите, что CD4 высокоэкспрессирован на Т-хелперах, но также может определяться на подгруппах макрофагов, дендритных клеток и NK-клеток.

CamelBio: ваш единый центр снабжения

CamelBio поддерживает производителей диагностических препаратов и научные институты, предоставляя обширный портфель сырья для производства ИВД, включая валидированные пары антител, оптимизированные моноклональные и поликлональные антитела и объемные вспомогательные реактивы. Для иммунологических проектов, направленных на изучение CD4 и связанных маркеров иммунных клеток, CamelBio может предоставить готовые комбинации антител с конъюгатами, сырье для редких мишеней и индивидуальные пакеты реактивов, адаптированные под потребности разработки вашего анализа — мы преодолеваем разрыв между открытием и клиническим применением.