Кроличьи поликлональные антитела к MMP14/MT1-MMP для ВБ, ИГХ-П, ИФ/ИКК, ИФА — P50281

Основные технические характеристики и параметры продукта

Биологический контекст: функция и локализация MMP14/MT1-MMP

• Матриксная металлопротеиназа 14 (MMP14), также известная как MT1-MMP, представляет собой мембранную металлопротеиназу, синтезируемую в виде зимогена, который для активации требует протеолитического расщепления. Она содержит характерные дисульфидные связи, кальций- и цинксвязывающие участки, ее активность регулируется фосфорилированием.
• Как эндопептидаза, MMP14 деградирует различные компоненты внеклеточного матрикса, в первую очередь коллаген, и является необходимым фактором персиеллюлярного коллагенолиза и ремоделирования соединительной ткани (PubMed:8015608).
  Связанные источники:
  PMID:8015608
• MMP14 активирует прогелатиназу A (pro-MMP2) путем протеолитического расщепления, действуя как положительный регулятор роста и миграции клеток. Вместе с pro-MMP2 она участвует в формировании фиброваскулярных тканей (PubMed:22065321, PubMed:12714657).
  Связанные источники:
  PMID:22065321
  PMID:12714657
• Фермент выступает регулятором сигнального пути Notch, опосредуя расщепление и ингибирование лиганда DLL1 (PubMed:21572390).
  Связанные источники:
  PMID:21572390
• MMP14 расщепляет ADGRB1 с высвобождением васкулостатина-40 — ингибитора ангиогенеза, а также расщепляет и инактивирует рецептор GDF15 GFRAL, модулируя аверсивный ответ пути GDF15-GFRAL (PubMed:22330140, PubMed:35177851).
  Связанные источники:
  PMID:22330140
  PMID:35177851
• В основном MMP14 локализуется на клеточной мембране, но также обнаруживается в меланосомах и цитоплазме, что соответствует ее роли в персиеллюлярном протеолизе и внутриклеточной сигнализации.
• Наиболее высокая экспрессия MMP14 наблюдается в стромальных клетках толстой кишки, молочной железы, головы и шеи, а также в опухолях легкого, что согласуется с его функцией в ремоделировании опухолевого микроокружения.

Рекомендации по проведению экспериментов и технические советы

• Иммуногеном служит синтетический пептид, соответствующий участку аминокислот 75–174 внеклеточного домена человеческой MMP14 — эта область консервативна у человека, мыши и крысы, что подтверждает заявленную перекрестную реактивность.
• При иммуноблоттинге профермент имеет подвижность около 66 кДа; активные обработанные формы могут определяться при меньших молекулярных массах. Для валидации профиля полос используйте соответствующие лизаты клеток или тканей (например, фибросаркомные клетки HT-1080, плацентарная ткань).
• При иммуногистохимии на парафиновых срезах (ИГХ-П) может потребоваться антигенретrievал; проводите тестирование на парафиновых срезах образцов опухолей толстой кишки, молочной железы или легкого. Ожидается окрашивание стромы.
• Для иммунофлуоресценции (ИФ/ИКК) необходима пермеабилизация для детекции цитоплазматической и мембранной MMP14. Используйте подходящие контроли по изотипу.
• При использовании в ИФА рекомендуется сочетать данный препарат с захватывающим антителом к другому эпитопу; благодаря поликлональной природе это антитело может обеспечивать стабильно высокий сигнал при использовании в качестве детектирующего.
• Как и для всех поликлональных антител, для конкретной тест-системы необходимо проверять консистентность результатов между разными сериями препарата.

CamelBio: ваш универсальный партнер по поиску реагентов

CamelBio предоставляет производителям диагностических систем и исследовательским лабораториям удобный универсальный канал закупки высококачественных сырьевых материалов для ИВД. Данные поликлональные антитела к MMP14/MT1-MMP подходят для исследований инвазии опухолей, ангиогенеза и ремоделирования тканей. Помимо отдельных реагентов мы предлагаем валидированные антительные пары, вспомогательные материалы большими партиями и индивидуальный поиск редких мишеней, помогая вам ускорить разработку тест-систем от концепции до клинического применения.