Моноклональное антитело против MITF для WB, IHC-P, ИФА — O75030

Основные технические характеристики и параметры продукта

Биологический контекст: функция и локализация MITF

• MITF (микрофтальмия-ассоциированный фактор транскрипции) — представитель семейства транскрипционных факторов с основным мотивом «спираль-петля-спираль» и лейциновой застежкой (bHLH-Zip), кодируется геном MITF (также обозначается как BHLHE32).
• Выполняет роль главного регулятора выживания меланоцитов, их дифференцировки и биогенеза меланосом, связываясь с ДНК-последовательностями M-бокса (5'-TCATGTG-3') и E-бокса (5'-CACGTG-3') в промоторах генов пигментации, таких как TYR и TYRP1 (PubMed:10587587, PubMed:22647378, PubMed:27889061). Связанные источники: PMID:10587587 PMID:22647378 PMID:27889061
• Участвует в клеточном ответе на доступность аминокислот через сигнальный путь MTOR: при достаточном количестве питательных веществ MTOR фосфорилирует MITF, что приводит к его инактивации; напротив, голодание или лизосомальный стресс ингибируют MTOR, способствуя дефосфорилированию MITF и его транскрипционной активации (PubMed:36608670). Связанные источники: PMID:36608670
• Локализуется преимущественно в ядре, но также обнаруживается в цитоплазме и на мембранах лизосом, что отражает его как транскрипционную, так и сигнальную роль.
• Экспрессируется в меланоцитах, пигментном эпителии сетчатки, головном мозге, плаценте и почках; при этом экспрессия в меланоцитах имеет ключевое значение для пигментации и развития связанных с ней патологий.
• В результате альтернативного сплайсинга образуется несколько изоформ, которые влияют на тканевую распределение и функциональную специфичность белка; мутации в гене MITF ассоциированы с синдромом Варденбурга типа 2А, синдромом Тица и синдромом COMMAD.
• Активность MITF строго регулируется посттрансляционными модификациями, включая фосфорилирование и убиквитинирование, которые модулируют его стабильность, аффинность связывания с ДНК и транскрипционную активность.

Экспериментальные рекомендации и технические советы

• Иммуноген соответствует аминокислотным остаткам 402–526 человеческого MITF (NP_001341533.1), область которого включает лейцин-застежной мотив димеризации; рекомендуем предварительно проверить реактивность к изоформам и доступность эпитопа в вашей экспериментальной системе.
• Для Вестерн-блоттинга (WB): прогнозируемая молекулярная масса MITF составляет около 59 кДа, однако наличие нескольких изоформ и посттрансляционных модификаций может привести к появлению дополнительных полос; проводите валидацию с использованием подходящих положительных контролей (например, пигментированные клеточные линии меланомы) и контролей загрузки.
• Для иммуногистохимии на парафиновых срезах (IHC-P): условия демаскировки антигена и разведение антитела следует подбирать эмпирически; в качестве положительных контролей можно использовать пигментированные ткани, такие как кожа или увеальная меланома.
• Для иммуноферментного анализа (ИФА): для определения оптимальных условий нанесения на планшет и детекции рекомендуется предварительное проведение шашшечной титровки; использование валидированных пар антител может повысить чувствительность анализа.
• Поскольку MITF является фактором транскрипции с низким уровнем экспрессии, для некоторых типов образцов для надежного детектирования может потребоваться обогащение пробы или использование высокочувствительных методов детекции.

CamelBio: ваш универсальный мост для закупки реагентов

CamelBio выступает в роли комплексного универсального партнера по закупке сырья для ИВД (in vitro диагностики), поддерживая исследователей и производителей на всех этапах от ранней разработки до клинического применения. Данное моноклональное антитело против MITF подходит для исследования биологии меланоцитов, нарушений пигментации и меланомы. CamelBio может предоставить дополнительные комплементарные реагенты: валидированные пары антител, крупные партии вспомогательных реагентов, оптимизированные моноклональные/поликлональные антитела для ваших анализов. При необходимости индивидуальной закупки реагентов к редким мишеням или технической консультации наша команда обеспечивает беспрепятственное снабжение, чтобы ускорить разработку вашей диагностической продукции.