Поликлональное антитело против MGEA5 для Вестерн-блоттинга, ИГХ-парафинов, ИФА - O60502

Основные характеристики и параметры продукта

Биологический контекст: Функция и локализация MGEA5/OGA

• Ген MGEA5 кодирует белок O-GlcNAказа (OGA), также известный как бета-N-ацетилглюкозаминидаза, NCOAT и менингиома-экспрессируемый антиген 5. Альтернативный сплайсинг генерирует несколько изоформ с потенциально различной каталитической активностью.
• OGA является гликозидгидролазой, которая специфически удаляет O-связанный N-ацетилглюкозамин (O-GlcNAc) с сериновых/треониновых остатков белков-мишеней, что представляет собой ключевую посттрансляционную модификацию, регулирующую сигнализацию, транскрипцию и стрессовые ответы. Связанные ссылки: PMID:11148210 PMID:11788610 PMID:20673219
• Он дегликозилирует широкий пул субстратов, включая CRYAB, ELK1, GSDMD, LMNB1 и TAB1, тем самым модулируя такие процессы, как воспаление, апоптоз и организация хроматина. Связанные ссылки: PMID:28939839 PMID:37962578
• OGA не обладает гистон-ацетилтрансферазной активностью и не связывает ацетил-КоА, что отличает его от бифункциональных ферментов и подтверждает его исключительную роль как O-глюкозаминазы. Связанные ссылки: PMID:24088714
• In vitro OGA может гидролизовать синтетические субстраты, такие как p-нитрофенил-β-GlcNAc, но не расщепляет субстраты на основе GalNAc, демонстрируя строгую специфичность. Связанные ссылки: PMID:20673219
• Белок локализуется как в ядре, так и в цитоплазме, что позволяет ему воздействовать на ядерные факторы (например, гистоны, факторы транскрипции) и цитоплазматические сигнальные молекулы, влияя таким образом на экспрессию генов и клеточный метаболизм.
• OGA является фосфопротеином; фосфорилирование может регулировать его ферментативную активность, субклеточное распределение или белок белковые взаимодействия, хотя функциональные последствия этого все еще изучаются.
• Универсально экспрессируемый, OGA демонстрирует самые высокие уровни мРНК в мозге, плаценте и поджелудочной железе — тканях с высокими метаболическими и пролиферативными потребностями, что согласуется с его ролью в динамическом цикле O-GlcNAc.

Экспериментальные рекомендации и технические советы

• Иммуноген охватывает аминокислоты 380-580, центральную область, консервативную среди изоформ; таким образом, антитело может детектировать несколько сплайс-вариантов. Убедитесь, что детектируемая полоса(ы) соответствуют ожидаемой молекулярной массе (~103 кДа) в вашем типе образца.
• Для Вестерн-блоттинга (WB) рассмотрите возможность использования экстрактов целых клеток или тканей человеческого, мышиного или крысиного происхождения, так как перекрестная реактивность подтверждена. OGA широко экспрессирован, но обогащение может наблюдаться в мозге или плаценте.
• При иммуногистохимии (ИГХ-П) можно ожидать как ядерного, так и цитоплазматического окрашивания; включите соответствующие негативные контроли (например, изотип-совпадающий контроль или блокирование пептидом) для подтверждения специфичности сигнала.
• При проведении ИФА оптимизируйте концентрации наносимого антигена и разведения антител, используя известные положительные образцы; реактивность антитела с рекомбинантным белком предполагает пригодность для сэндвич- или прямых вариантов ИФА.
• Поскольку уровни O-GlcNAc колеблются при клеточном стрессе, рассмотрите возможность обработки клеток ингибиторами O-глюкозаминазы (например, Thiamet G) для стабилизации модификации перед лизисом, что может повлиять на распознавание антителом определенных эпитопов.
• Всегда валидируйте антитело в вашем конкретном экспериментальном контексте, так как его работа может варьироваться в зависимости от методов фиксации, демаскировки антигена и систем детекции.

CamelBio: Ваш мост для комплексного снабжения

CamelBio — ваш надежный партнер в снабжении сырьем для ИВД, соединяющий производителей диагностических систем и исследовательские лаборатории с высококачественными антителами и реагентами. Это поликлональное антитело против MGEA5, нацеленное на критический фермент O-глюкозаминазу, поддерживает исследования путей и заболеваний, связанных с O-GlcNAцилированием. Помимо отдельных антител, CamelBio предоставляет валидированные пары антител, оптимизированные моноклональные и поликлональные антитела, вспомогательные реагенты оптом и помогает в поиске сырья для редких мишеней — способствуя развитию вашей диагностики от концепции до клиники.