Кроличье моноклональное антитело против METTL3 [валидировано KD] для вестерн-блоттинга, иммунопреципитации, IF/ICC, IHC-P, ChIP, ELISA - Q86U44

Основные характеристики и параметры продукта

Биологический контекст: Функция и локализация METTL3

• METTL3 (каталитическая субъединица N(6)-аденозин-метилтрансферазы) — это белок массой 64 кДа, локализующийся в ядерных спеклах и цитоплазме. Он образует гетеродимерный комплекс с METTL14, который составляет каталитическое ядро для нанесения m6A-модификаций на РНК.
  Связанные публикации:
  PMID:27281194
  PMID:27373337
  PMID:27627798
• METTL3 наносит m6A в консенсусной последовательности 5′-[AG]GAC-3′ на мРНК, регулируя стабильность транскриптов, процессинг, эффективность трансляции и редактирование.
  Связанные публикации:
  PMID:22575960
  PMID:24284625
  PMID:25719671
• Метилирование m6A способствует дестабилизации и деградации мРНК после их высвобождения в нуклеоплазму, обеспечивая динамический контроль экспрессии генов.
  Связанные публикации:
  PMID:28637692
• В эмбриональных стволовых клетках m6A-метилирование транскриптов, ассоциированных с плюрипотентностью, катализируемое METTL3, стимулирует их распад, тем самым способствуя выходу из наивного состояния и дифференцировке.
• METTL3 участвует в регуляции циркадных ритмов, ускоряя ядерный процессинг мРНК генов часов и модулируя метаболизм липидов в печени.
  Связанные публикации:
  PMID:30428350
• При УФ-индуцированном повреждении ДНК METTL3 быстро рекрутируется в сайты повреждения, где катализирует образование m6A на поли(А) транскриптах, способствуя рекрутированию ДНК-полимеразы κ (POLK).
  Связанные публикации:
  PMID:28297716
• В цитоплазме METTL3 взаимодействует с факторами инициации трансляции, усиливая трансляцию мРНК независимо от своей метилтрансферазной активности; эта функция связана с пролиферацией раковых клеток.
  Связанные публикации:
  PMID:27117702
• Во время инфекции SARS‑CoV‑2 METTL3 добавляет m6A-модификации к вирусной РНК, снижая связывание с RIG‑I и тем самым ослабляя врожденный иммунный ответ.
  Связанные публикации:
  PMID:33961823

Экспериментальные рекомендации и технические советы

• Иммуноген соответствует N-концевой области (аминокислоты 1–156) белка METTL3 человека. При использовании этого антитела учитывайте, что оно может распознавать эпитопы в пределах этого фрагмента; валидируйте связывание с полноразмерным METTL3 и потенциальными изоформами в вашей экспериментальной системе.
• Для вестерн-блоттинга прогнозируемая молекулярная масса составляет ~64 кДа. Оптимизируйте процент геля (например, 10% SDS-PAGE) и условия трансфера для белков среднего размера. Используйте соответствующие положительные и отрицательные контроли.
• Заявленная пригодность антитела для ChIP предполагает, что оно может иммунопреципитировать комплексы METTL3–РНК или хроматина; оптимизируйте условия сшивания, сонификации и строгости отмывок для вашего конкретного протокола.
• В иммунофлуоресценции (IF/ICC) и иммуногистохимии на парафиновых срезах (IHC-P) условия фиксации и пермеабилизации должны быть оптимизированы для сохранения эпитопа при обеспечении доступа антитела.
• Указаны несколько областей применения; однако каждая лаборатория должна самостоятельно установить и оптимизировать рабочие характеристики антитела в своих экспериментальных условиях.

CamelBio: Ваш мост к поставкам "под ключ"

CamelBio — ваш партнер по поставкам сырья для IVD-диагностики "под ключ", предоставляющий валидированные пары антител, моноклональные/поликлональные антитела и вспомогательные реагенты в больших объемах для эпитранскриптомных и онкологических исследований. От первоначального дизайна анализа до клинической валидации мы поддерживаем разработку надежных диагностических инструментов, нацеленных на пути модификации РНК.