Кроличья поликлональная антитело против мезотелина для WB, ELISA — Q13421

Основные спецификации и параметры продукта

Биологический контекст: функция и локализация мезотелина

• Мезотелин кодируется геном MSLN и синтезируется в виде предшественника, который расщепляется на два продукта: потенцирующий фактор мегакариоцитов (MPF) и зрелый мембранносвязанный мезотелин.
• Мембранно-заякоренный мезотелин может участвовать в клеточной адгезии, вероятно, в межклеточных взаимодействиях или взаимодействиях клетка-матрикс.
• Потенцирующий фактор мегакариоцитов (MPF) работает как цитокин, способный усиливать образование колоний мегакариоцитов in vitro, что указывает на его роль в гемопоэзе.
• Белок локализуется на клеточной мембране с помощью GPI-якоря, также обнаруживается в аппарате Гольджи и в секретируемой форме после расщепления и высвобождения.
• Мезотелин экспрессируется в мезотелиальных клетках, выстилающих плевру, брюшину и перикард; в более низких концентрациях обнаруживается в легких, сердце, плаценте и почках.
• Он сильно сверхэкспрессирован при мезотелиомах, раке яичника и некоторых плоскоклеточных карциномах, что делает его полезным опухолевым маркером и терапевтической мишенью.
• Посттрансляционные модификации включают образование дисульфидных связей, N-связанную гликозилирование и прикрепление GPI-якоря — эти процессы критически важны для стабильности белка и его ассоциации с мембраной.
• Альтернативный сплайсинг, фосфорилирование и протеолитическое расщепление регулируют образование множества функциональных форм и распределение белка по субклеточным компартментам.

Экспериментальные рекомендации и технические советы

• Иммуноген соответствует внеклеточному домену (а.о. 296–606) человеческого мезотелина, который консервативен у мыши (подтверждено перекрестной реактивностью), поэтому антитело подходит для детекции образцов как человека, так и мыши в методах WB и ELISA.
• При Вестерн-блоттинге учитывайте, что полноразмерный предшественник (~69 кДа) расщепляется, поэтому в зависимости от образца можно наблюдать несколько полос (например, ~40 кДа зрелого мезотелина и ~31 кДа MPF). Для валидации используйте рекомбинантный белок или лизаты высокоэкспрессирующих клеточных линий (например, линии рака яичника такие как OVCAR-3 или линии мезотелиомы).
• В ELISA антитело можно использовать как захватывающий или детектирующий реагент; оптимальная концентрация при покрытии и выбор пары с детектирующим антителом должны определяться эмпирически, в идеале с использованием рекомбинантного мезотелина в качестве стандарта.
• Поскольку это поликлональное антитело, возможна вариабельность между партиями; всегда проводите пилотный тест с положительными и отрицательными контролями для подтверждения реактивности и специфичности.
• Учитывайте, что эндогенный растворимый MPF может обнаруживаться в сыворотке или супернатантах клеточных культур; соответственно корректируйте условия блокирования и отмывки для снижения фонового сигнала.

CamelBio: ваш единый поставщик биологических реагентов

CamelBio сотрудничает с производителями диагностических систем, научными лабораториями и исследовательскими институтами, обеспечивая бесперебойные поставки сырья для ИВД, технические услуги и консалтинг от разработки концепции до клинических испытаний. Данная поликлональная антитела против мезотелина предназначена для исследований в области онкологии и мегакариоцитов, и мы можем подобрать или разработать валидированные пары антител, оптимизированные моноклональные/поликлональные антитела, вспомогательные реагенты в больших объемах и сырье для редких мишеней, чтобы ускорить разработку ваших тест-систем. Доверьте закупку реагентов CamelBio — мы предлагаем надежные высококачественные биологические реагенты и экспертную поддержку на всех этапах работы.