Поликлональное антитело против мезотелина для WB, IF-P, IHC-P, ELISA - Q13421

Основные характеристики и параметры продукта

Биологический фон: функция и локализация мезотелина

• Мезотелин, также известный как антиген CAK1 или фактор, потенцирующий мегакариоциты, представляет собой белок, кодируемый геном MSLN, и существует в виде нескольких изоформ, образующихся в результате альтернативного сплайсинга.
• Белок синтезируется в виде предшественника, который расщепляется на зрелый мезотелин, закреплённый в мембране посредством GPI-связи, и секретируемый фактор, потенцирующий мегакариоциты (MPF).
• Считается, что мезотелин, закреплённый в мембране, участвует в клеточной адгезии, потенциально опосредуя взаимодействия между мезотелиальными клетками и клетками других типов.
• MPF, секретируемый фрагмент, первоначально был идентифицирован благодаря его способности усиливать образование колоний мегакариоцитов in vitro.
• На субклеточном уровне мезотелин локализуется в клеточной мембране благодаря GPI-якорю, а также в аппарате Гольджи в процессе биосинтеза; фрагмент MPF секретируется во внеклеточное пространство.
• Наиболее выражена экспрессия в лёгких и мезотелиальных клетках, более низкие уровни наблюдаются в сердце, плаценте и почках; на уровне белка он значительно сверхэкспрессирован при мезотелиомах, раке яичников и некоторых плоскоклеточных карциномах.
• К основным посттрансляционным модификациям относятся N-связанное гликозилирование, образование дисульфидных связей, фосфорилирование и присоединение GPI-якоря, которые в совокупности определяют его структурные и функциональные свойства.
• Ключевые слова UniProt подчёркивают его участие в клеточной адгезии, связь с мембраной и значимость для заболеваний благодаря аномальной экспрессии при раке.

Экспериментальные рекомендации и технические советы

• Иммуноген разработан на основе аминокислот 296–606 человеческого мезотелина и охватывает внеклеточный домен; этот участок может частично совпадать с фрагментом MPF, что потенциально позволяет выявлять обе формы.
• При проведении вестерн-блоттинга ожидается полоса около 69 кДа, соответствующая полноразмерному предшественнику или форме, закреплённой в мембране; дополнительные полосы около 30–40 кДа могут представлять отделившийся фрагмент MPF.
• При выполнении IHC-P рассмотрите антигенную демаскировку при pH 6 или 9 и подтвердите специфичность окрашивания с использованием срезов мезотелиальной ткани или ткани рака яичников, для которых известна высокая экспрессия мезотелина.
• Для IF-P фиксируйте клетки параформальдегидом и проводите соответствующую пермеабилизацию; подтвердите локализацию сигнала в клеточной мембране и аппарате Гольджи.
• Валидируйте реактивность с образцами человека, мыши и крысы с использованием известных положительных и отрицательных клеточных линий; например, OVCAR-3 (рак яичников человека) или AB22 (мезотелиома мыши) в качестве положительного контроля.
• Для применения в ELISA может быть полезно протестировать форматы как с захватом, так и с детекцией, используя рекомбинантный белок мезотелина/MPF в качестве стандарта.
• Обратите внимание, что антитело может выявлять как мембраносвязанные, так и растворимые формы; для их различения учитывайте подготовку образца (клеточный лизат или кондиционированная среда).

CamelBio: универсальный источник поставок

CamelBio предоставляет разработчикам IVD и научно-исследовательским институтам оптимизированный путь от концепции до клинического применения, поставляя сырьё диагностического класса, такое как данное поликлональное антитело против мезотелина для исследований онкологических и мезотелиальных мишеней. Наша универсальная платформа предлагает валидированные пары антител, оптимизированные поликлональные и моноклональные антитела, вспомогательные реагенты оптом и индивидуальный поиск редких мишеней, обеспечивая вас необходимыми инструментами на каждом этапе. Независимо от того, разрабатываете ли вы ELISA для выявления рака яичников или исследуете биомаркеры мезотелиомы, CamelBio помогает преодолеть разрыв между научным открытием и созданием диагностических решений.