Поликлональное антитело против ME2 для Вестерн-блоттинга, ИФА - P23368

Основные спецификации и параметры продукта

Биологический контекст: функция и локализация ME2

• ME2 (НАД-зависимая яблочная энзима, митохондриальная) также известна как ODS1 и яблочная энзима 2. Кодируется геном ME2 у человека.
• Этот фермент катализирует окислительное декарбоксилирование малата в пируват, используя НАД+ в качестве кофактора. Реакция является ключевой для связи цикла трикарбоновых кислот с метаболизмом пирувата и продукцией НАДН.
• ME2 является аллостерическим ферментом и требует двухвалентных ионов металлов для активности, обычно Mg2+ или Mn2+, которые облегчают связывание субстрата и катализ.
• Белок локализуется в матриксе митохондрий, где функционирует в метаболизме малата. Импортируется в митохондрии с помощью N-концевого сигнального пептида, который отщепляется после транслокации.
• Альтернативный сплайсинг генерирует несколько транскрипционных вариантов, потенциально дающих изоформы с различными регуляторными свойствами или паттернами экспрессии.
• Посттрансляционные модификации включают ацетилирование, которое может регулировать активность фермента или стабильность в ответ на клеточные метаболические состояния.
• ME2 экспрессируется широко, но играет специализированную роль в тканях с высокой митохондриальной активностью, таких как печень, сердце и мозг, где способствует метаболизму липидов и аминокислот.
• Ключевые слова из UniProt подчеркивают его характеристики: 3D-структура (имеются структурные данные), ацетилирование, аллостерический фермент, альтернативный сплайсинг, прямое секвенирование белка, связывание металлов, митохондрия, НАД, оксидоредуктаза и референсный протеом.

Экспериментальные рекомендации и технические советы

• Иммуноген разработан против C-концевой области (аа 220-479) человеческого ME2. Эта область отличается от N-концевого сигнального пептида, поэтому ожидается, что антитело будет распознавать зрелую митохондриальную форму.
• Будучи поликлональным антителом, оно может детектировать несколько изоформ, возникающих в результате альтернативного сплайсинга. При Вестерн-блоттинге основная полоса ожидается на уровне ~65 кДа, но дополнительные полосы могут появляться в зависимости от образца и условий.
• Для Вестерн-блоттинга использование лизатов, обогащенных митохондриями, или тканей с высоким содержанием митохондрий (например, печень, сердце) может повысить чувствительность детекции. Оптимизируйте условия блокирования и промывок для снижения фона.
• В ИФА антитело можно использовать для прямой или непрямой детекции. Проведите валидацию с рекомбинантным белком ME2 или клеточными лизатами для подтверждения специфичности и определения оптимального разведения.
• Перекрестная реактивность указана для человеческого ME2. Для других видов перед использованием проверьте гомологию последовательности в области иммуногена, так как реактивность не гарантирована.

CamelBio: Ваш мост к комплексным поставкам

CamelBio предлагает комплексный портфель сырья для ИВД, включая валидированные пары антител, оптимизированные моноклональные и поликлональные антитела, вспомогательные реагенты оптом и поиск редких мишеней. Для исследований метаболизма и митохондрий, связанных с ME2, мы предоставляем готовые к использованию реагенты и можем помочь в разработке индивидуальных антител в соответствии с вашими конкретными требованиями к анализу. Позвольте CamelBio стать вашим надежным партнером от концепции до клиники.