Поликлональные кроличьи антитела против MDA5 для Вестерн-блоттинга и ИФА — Q9BYX4

Основные характеристики и параметры продукта

Биологическая справка: функция и локализация MDA5

• MDA5 (IFIH1), также известный как Helicard, RLR-2 или белок 5, ассоциированный с дифференцировкой меланомы, относится к семейству рецепторов RIG-I-подобных рецепторов (RLR) цитоплазматических РНК-хеликаз DExD/H-бокса.
• Он функционирует как сенсор вирусных нуклеиновых кислот в системе врожденного иммунитета и играет ключевую роль в запуске противовирусных ответов, включая индукцию интерферонов типа I и провоспалительных цитокинов (PubMed:28594402, PubMed:32169843, PubMed:33727702). Связанные источники: PMID:28594402 PMID:32169843 PMID:33727702
• MDA5 распознает длинные двухцепочечные РНК (длиной более 1 т.п.н.) и мРНК, не имеющие 2'-О-метилирования на 5'-капе, в качестве патогенассоциированных молекулярных паттернов (PubMed:22160685). Связанные источники: PMID:22160685
• После связывания с лигандом MDA5 ассоциируется с митохондриальным противовирусным сигнальным белком MAVS, что запускает активацию киназ TBK1/IKBKE и фосфорилирование IRF3/IRF7 для стимуляции транскрипции генов интерферона.
• Этот рецептор обнаруживает широкий спектр вирусов, включая пикорнавирусы (Энцефаломиокардит и риновирусы), флавивирусы (денге и вирус Западного Нила), реовирус, вакцинный вирус и коронавирус SARS-CoV-2 (PubMed:28606988, PubMed:33440148, PubMed:33514628). Связанные источники: PMID:28606988 PMID:33440148 PMID:33514628
• Субклеточно MDA5 обнаруживается в цитоплазме, ядре и митохондриях.
• Конститутивно экспрессируется во многих тканях на низком уровне, при этом относительно высокая концентрация наблюдается в плаценте, поджелудочной железе и селезенке; в мозге, яичках и легких практически не определяется.
• MDA5 является фосфопротеином, содержит CARD-домены, АТФ-зависимый домен хеликазы DExD/H-бокса и C-концевой домен; подвергается регуляторной убиквитинации.

Экспериментальные рекомендации и технические советы

• Иммуноген, использованный для получения этих антител, включает аминокислоты 277–490 человеческого IFIH1; антитела могут обнаруживать как полноразмерный белок (~117 кДа), так и потенциальные короткие изоформы или продукты расщепления.
• Для Вестерн-блоттинга рекомендуется использовать лизаты стимулированных интерфероном или инфицированных вирусом человеческих клеток для повышения уровня экспрессии MDA5. Обязательно используйте соответствующие позитивные и негативные контроли и проверяйте размер полос относительно предсказанной молекулярной массы.
• При проведении ИФА оптимизируйте условия покрытия и детекции, используя антитело в сочетании с подходящими стандартами рекомбинантного или нативного MDA5; необходимо оценить перекрестную реактивность с другими представителями семейства RLR.
• Как и для любых поликлональных антител, вариабельность между сериями может влиять на эффективность работы; мы рекомендуем титровать и валидировать каждую новую серию в вашей конкретной экспериментальной системе.

CamelBio: ваш универсальный партнер по поиску реагентов

CamelBio предоставляет универсальный доступ к сырью для ИВД, техническим услугам и консалтингу для поддержки разработки диагностических систем от идеи до клинических испытаний. Наш портфель включает валидированные поликлональные антитела, такие как это антитело против MDA5 для исследований в области врожденного иммунитета; через нашу глобальную сеть мы можем найти антителные пары, объемные вспомогательные реагенты и редкие мишени. Доверьте разработку вашего теста надежным сырьевым материалам с интегрированной цепочкой поставок от CamelBio и ускорьте ваш проект.