Кроличье поликлональное антитело против MCM5 для вестерн-блоттинга, иммунофлуоресценции/иммуноцитохимии, иммунопреципитации, ELISA - P33992

Основные характеристики и параметры продукта

Биологический контекст: функция и локализация MCM5

• MCM5 (CDC46/P1-CDC46) является фактором лицензирования репликации ДНК и основным компонентом комплекса MCM2-7 — эукариотической репликативной хеликазы, необходимой для инициации и элонгации репликации ДНК один раз за клеточный цикл. Связанные ссылки: PMID:40940420

• Вместе с CDC45 и GINS, MCM5 формирует хеликазу CDC45-MCM-GINS (CMG), которая расплетает двуцепочечную ДНК на репликационных вилках, служа центральной платформой для сборки реплисомы. Связанные ссылки: PMID:16899510, PMID:32453425, PMID:34694004

• Кольцо MCM2-7 содержит шесть активных сайтов АТФазы, образованных на стыках субъединиц; MCM5 вносит консервативный мотив "аргининового пальца" в АТФ-связывающий карман соседней субъединицы, внося дифференциальный вклад в активность хеликазы. Связанные ссылки: PMID:32453425

• MCM5 локализуется в ядре и связывается с хроматином в зависимости от клеточного цикла, играя критическую роль в лицензировании репликации и прогрессии S-фазы.

• Посттрансляционные модификации, включая ацетилирование, фосфорилирование и убиквитин-подобное конъюгирование, регулируют стабильность и активность MCM5.

• MCM5 необходим для стабильности генома; мутации в гене MCM5 ассоциированы с синдромом Мейера-Горлина 8 типа (MGORS8) и другими нарушениями развития.

• MCM5 является членом семейства АТФ-зависимых хеликаз MCM, имеет консервативные домены с MCM2-7 и высоко экспрессируется в пролиферирующих клетках.

• Предсказанная молекулярная масса белка составляет ~82 кДа, он содержит нуклеотид-связывающие мотивы, критически важные для его ферментативной функции.

Экспериментальные рекомендации и технические советы

• Иммуноген (рекомбинантный белок, охватывающий аминокислоты 1–230 MCM5 человека) нацелен на N-концевую область, содержащую консервативные мотивы; наблюдалась перекрестная реактивность с ортологами мыши и крысы. Для видов, не указанных в списке, проверьте гомологию последовательности перед использованием.
• Для вестерн-блоттинга (WB) рассмотрите начальное разведение 1:500–1:2000 и используйте ядерные или тотальные клеточные лизаты из пролиферирующих клеток, где MCM5 присутствует в большом количестве. Ожидаемая полоса — около 82 кДа; учтите, что фосфорилирование может вызывать незначительные сдвиги подвижности.
• При иммунофлуоресценции/иммуноцитохимии (IF/ICC) MCM5 демонстрирует ядерное окрашивание, зависящее от клеточного цикла; оптимизируйте условия фиксации и пермеабилизации для сохранения хроматин-связанного белка.
• Для иммунопреципитации (IP) антитело может обогащать нативный MCM5 и его ассоциированный комплекс MCM; для подтверждения целостности комплекса валидируйте ко-иммунопреципитацию других субъединиц MCM.

CamelBio: Ваш универсальный источник реагентов

CamelBio выступает в качестве комплексного поставщика сырья для ИВД, поддерживая производителей диагностических систем и исследовательские институты на всех этапах — от концепции до клиники. Для исследований репликации ДНК и клеточного цикла мы предлагаем валидированные поликлональные антитела против MCM5, а также портфель антител к семейству MCM, рекомбинантных белков и вспомогательных реагентов. Наш универсальный сервис оптимизирует процесс закупок, гарантируя, что вы получите оптимизированные антитела и надежную техническую поддержку для разработки ваших анализов.