Кроличьи поликлональные антитела против MAPK1/MAPK3 для Вестерн-блоттинга, ИФ/МЦК, ИФА - P28482 / P27361

Основные спецификации и параметры продукта

Биологическое предыстория: Функция и локализация MAPK1/MAPK3

• MAPK1 (ERK2, p42-MAPK) и MAPK3 (ERK1, p44-MAPK) — это два прототипных митоген-активируемых белковых киназы (MAPK), которые составляют основу консервативного сигнального каскада MAPK/ERK.
• После активации MAPK1/3 фосфорилируют широкий спектр ядерных и цитоплазматических субстратов, включая факторы транскрипции (например, ELK1, FOS), белки цитоскелета и другие киназы, регулируя рост клеток, пролиферацию, дифференцировку, адгезию и выживаемость.
• MAPK1 специфически фосфорилирует GLI1 в ответ на сигнал от белка smoothened, способствуя диссоциации GLI1 от SUFU и его транслокации в ядро, тем самым положительно регулируя путь Hedgehog. Связанные ссылки: PMID:35831023
• В условиях гипоксии MAPK1 фосфорилирует фосфоглицераткиназу PGK1, направляя ее в митохондрии и подавляя производство ацетил-коэнзима А из пирувата. Связанные ссылки: PMID:26942675
• Киназа перемещается между цитоплазмой и ядром, локализуясь в фокальных адгезиях, кавеолах, цитоскелете (включая центросомы и веретена деления) и мембранных структурах в зависимости от клеточного контекста.
• Киназная активность MAPK1 жестко регулируется событиями фосфорилирования и дефосфорилирования; она служит узлом распространения сигнала, сама фосфорилируя нижестоящие киназы, такие как RSK, MSK, MNK и MAPKAP-киназы.
• Посттрансляционные модификации включают активирующий фосфорилирование по остаткам Thr и Tyr в активационной петле, ацетилирование и убиквитинирование, которые модулируют ее стабильность, локализацию и белки-партнеры.
• Нокаут или аномальная экспрессия и сигналинг MAPK1/3 связаны с раком, неврологическими расстройствами и другими заболеваниями; киназа является мишенью взаимодействий «хозяин-вирус».

Экспериментальное руководство и технические советы

• Эти кроличьи поликлональные антитела были получены против синтетического пептида, соответствующего аминокислотам 200-300 человеческого MAPK1 и MAPK3 (ERK2 и ERK1); предполагается, что они распознают обе киназы и могут выявлять несколько полос при вестерн-блоттинге из-за изоформ и фосфорилированных форм.
• Для вестерн-блоттинга загружайте 20–30 мкг общего лизата белка и используйте соответствующие контроли (например, клетки, культивируемые в сывороточном голодании, против стимулированных факторами роста), чтобы наблюдать активацию ERK. Ожидаемые молекулярные веса варьируются от 36 до 43 кДа.
• При иммунофлуоресценции/МЦК фиксируйте клетки 4% параформальдегидом и пермеабилизируйте 0,1% Triton X-100; рекомендуется инкубация с первичными антителами в течение ночи при 4°C. Проверьте специфичность окрашивания с помощью блокировки пептидом или нокауна с помощью siRNA.
• Для ИФА эти поликлональные антитела можно использовать как реагент для захвата или детекции; оптимальные условия покрытия и детекции следует определить эмпирическим путем. Согласованная пара моноклональных антител может повысить чувствительность и специфичность.
• Антитела перекрестно реагируют с MAPK1/MAPK3 мыши и крысы; однако проведите валидацию, специфичную для вида, в вашей экспериментальной системе для подтверждения реактивности и соотношения сигнал/шум.

CamelBio: Ваш мост для комплексных закупок

CamelBio — ваш надежный партнер комплексных закупок сырья для IVD, от концепции до клиники. Эти поликлональные антитела против MAPK1/MAPK3 демонстрируют нашу приверженность предоставлению высококачественных иммунологических реагентов для разработки диагностических средств. Помимо антител, мы поставляем валидированные пары антител, рекомбинантные антигены, вспомогательные реагенты оптом и индивидуальные решения для закупок, чтобы ускорить разработку ваших анализов в области трансдукции сигналов и онкологических исследований.