Кроличьи поликлональные антитела Anti-MAD2/MAD2L1 для Вестерн-блоттинга и ИФА - Q13257

Основные спецификации и параметры продукта

Биологический контекст: Функция и локализация белка MAD2A контрольной точки сборки митотического веретена

• MAD2L1 (MAD2A) является ключевым компонентом митотического контрольного комплекса (MCC), который ингибирует комплекс/циклоазу анафазы (APC/C), задерживая сегрегацию хромосом до тех пор, пока все хромосомы не будут правильно прикреплены к митотическому веретену.
  Связанные публикации:
  PMID:10700282
  PMID:11804586
  PMID:15024386
• Комплекс MCC состоит из CDC20, MAD2L1, BUB1B/BUBR1 и BUB3; его связывание с APC/C поддерживает комплекс в неактивном состоянии, предотвращая преждевременное наступление анафазы.
  Связанные публикации:
  PMID:15020684
  PMID:27509861
• После подавления контрольной точки сборки веретена комплекс MCC-APC/C рекрутирует фермент E2 UBCH10, что приводит к аутоубиквитинированию и деградации CDC20. Это повторно активирует APC/C, запуская переход метафаза/анафаза.
  Связанные публикации:
  PMID:27509861
• MAD2L1 существует в двух различных конформациях: открытой (O-MAD2) и закрытой (C-MAD2). Закрытая форма собирается с MAD1L1 на неприкрепленных кинетохорах, создавая матрицу, которая катализирует конверсию O-MAD2 в C-MAD2, усиливая сигнал контрольной точки.
  Связанные публикации:
  PMID:29162720
• В результате альтернативного сплайсинга образуются две изоформы (MAD2A и MAD2B); MAD2A (кодируемый геном MAD2L1) является митотически регулируемой изоформой, необходимой для функции контрольной точки веретена.
• Белок имеет динамическую локализацию на протяжении всего клеточного цикла: он находится в цитоплазме и ядре во время интерфазы, концентрируется на кинетохорах и полюсах веретена во время митоза и перераспределяется при активации контрольной точки.
• Посттрансляционные модификации, включая ацетилирование и фосфорилирование, тонко регулируют активность и взаимодействия MAD2L1. Рассчитанная в UniProt молекулярная масса составляет ~23,5 кДа, тогда как данные продукта указывают значение ~24 кДа.

Экспериментальные рекомендации и технические советы

• Использованный иммуноген (аа 1-205) охватывает N-концевую область, критически важную для взаимодействия с MAD1 и конформационного переключения. Такая конструкция позволяет детектировать как открытую, так и закрытую форму MAD2.
• При Вестерн-блоттинге ожидайте полосу в районе 24 кДа. Для подтверждения специфичности используйте митотически синхронизированные клетки (например, обработанные нокодазолом) вместе с контролем интерфазы.
• Для ИФА можно использовать как прямой, так и сендвич-формат; в качестве стандарта рекомендуется использовать рекомбинантный белок MAD2L1.
• Предполагается перекрестная реакция антитела с мышиным и крысиным MAD2L1 на основе консервативности последовательности; рекомендуется валидация в соответствующих тканях или клеточных лизатах.
• Для функциональных исследований рекомендуется сочетать использование антитела с протоколами синхронизации клеток для обогащения митотических популяций и улучшения детекции сигнала.

CamelBio: ваш универсальный поставщик

CamelBio предоставляет производителям диагностикумов, лабораториям и исследовательским институтам упрощенный доступ к высококачественному сырью для ИВД (in vitro диагностики) и технической поддержке. Данные поликлональные антитела к MAD2L1 подходят для исследования клеточного цикла и онкологии; разработчики также могут заказать валидированные пары антител, рекомбинантные белки и вспомогательные реагенты через интегрированную сеть поставок CamelBio. Независимо от того, нуждаетесь ли вы в антителах к редким мишеням или оптимизации систем детектирования, CamelBio предлагает индивидуальные B2B решения для ускорения реализации вашего проекта от идеи до клиники.