Кроличьи поликлональные антитела к LC3A/LC3B для вестерн-блоттинга (WB) - Q9GZQ8/Q9H492

Основные характеристики и параметры продукта

Биологическое обоснование: функция и локализация LC3A/LC3B

• Микротрубочка-ассоциированный белок 1 легкая цепь 3 бета (LC3B, также известный как ATG8F) — это убиквитин-подобный модификатор, играющий центральную роль в аутофагии, в частности в формировании аутофагосомных вакуолей (аутофагосом). Связанные ссылки: PMID:20418806, PMID:23209295, PMID:28017329
• LC3B имеет решающее значение для митофагии — процесса селективной аутофагии, удаляющего поврежденные митохондрии; при митохондриальном делении и клеточном стрессе LC3B связывается с C-18 церамидами, закрепляя аутофаголизосомы на внешних мембранах митохондрий. Связанные ссылки: PMID:23209295, PMID:28017329, PMID:22922758
• LC3B способствует первичному цилиогенезу путем удаления OFD1 из центриолярных сателлитов через путь аутофагии. Связанные ссылки: PMID:24089205
• Взаимодействуя с рецептором ретикулофагии TEX264, LC3B участвует в ремоделировании эндоплазматического ретикулума в аутофагосомы во время стресса, вызванного дефицитом питательных веществ, которые впоследствии сливаются с лизосомами для обновления ЭР. Связанные ссылки: PMID:31006537, PMID:31006538
• При стрессе, вызванном нехваткой питательных веществ, LC3B напрямую привлекает фактор нуклеации актина JMY к поверхностям мембран фагофоров, способствуя нуклеации актина и биогенезу аутофагосом. Связанные ссылки: PMID:30420355
• Субклеточно LC3B обнаруживается на мембранах аутофагосом, цитоплазматических везикулах, эндомембранной системе, мембранах митохондрий и цитоскелете.
• LC3B наиболее обильно экспрессируется в сердце, головном мозге, скелетных мышцах и яичках, с низкой экспрессией в печени.
• LC3B классифицируется как участник пути аутофагии и убиквитин-подобной конъюгации; он существует в виде липопротеина и фосфопротеина, что подчеркивает его регуляторные модификации. Эти антитела также распознают LC3A (MAP1LC3A), близкородственный паралог с консервативными функциями в аутофагии.

Экспериментальные рекомендации и технические советы

• Иммуногеном является синтетический пептид с N-конца (аминокислоты 1-60) LC3A человека, область которого высококонсервативна по отношению к LC3B. Ожидается перекрестная реактивность как с формами LC3A, так и с LC3B из-за гомологии последовательностей.
• При вестерн-блоттинге могут быть обнаружены как нелипидированная (LC3-I), так и липидированная (LC3-II) формы; LC3-II мигрирует немного ниже (~14-16 кДа) в SDS-PAGE. Используйте соответствующие контроли (например, индукцию аутофагии голоданием или ингибиторами) для различения форм.
• Для иммунофлуоресцентных исследований оптимизируйте условия фиксации и пермеабилизации, так как LC3 часто окрашивает аутофагические структуры (пункты). Совместное окрашивание с лизосомальными маркерами может помочь подтвердить аутофагический поток.
• В иммуногистохимии может потребоваться демаскировка антигена из-за расположения эпитопа. По возможности подтверждайте специфичность антител с помощью нокдауна si/shRNA или блокирующего пептида.

CamelBio: ваш универсальный партнер по снабжению

CamelBio предлагает производителям диагностических средств, лабораториям и научно-исследовательским институтам оптимизированное решение по закупке сырья для IVD. Данные поликлональные антитела к LC3A/LC3B подходят для исследований, связанных с аутофагией, и разработки анализов. Как партнер с единым источником поставок, CamelBio также может предоставить валидированные пары антител, вспомогательные реагенты оптом и помочь в поиске редкого сырья для ускорения ваших проектов от концепции до клиники.