Поликлональные антитела к KPNA4 для WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - O00629

Основные характеристики и параметры продукта

Биологическое обоснование: функции и локализация KPNA4

• KPNA4 кодирует субъединицу импортина альфа-3 (также известную как импортин альфа Q1, Qip1 или кариоферин субъединица альфа-4), адаптерный белок массой 58 кДа, критически важный для классического ядерного импорта. Связанные ссылки: PMID:20818336
• Функционирует путем связывания субстратов, содержащих простые или бипартитные сигналы ядерной локализации (NLS), и их соединения с импортином бета (KPNB1) для транспорта через ядерный поровый комплекс (NPC). Связанные ссылки: PMID:20818336, PMID:28760339, PMID:29042532
• Комплекс «импортин-субстрат» стыкуется с NPC посредством взаимодействий KPNB1 с нуклеопоринами и перемещается энергозависимым образом, зависящим от Ran-GTP; направленность процесса обеспечивается асимметричным распределением Ran-GTP и Ran-GDP. Связанные ссылки: PMID:20818336, PMID:28760339, PMID:29042532
• KPNA4 опосредует ядерный импорт различных грузов, включая AARS1, MRTFA и RANBP3, а также облегчает проникновение в ядро вирусных белков, таких как UL84 цитомегаловируса человека, посредством распознавания неклассических NLS. Связанные ссылки: PMID:10567565, PMID:20818336, PMID:28760339
• Субклеточно KPNA4 локализуется как в цитоплазме, так и в ядре, что согласуется с его ролью в челночном транспорте грузов в ядро.
• Белок высоко экспрессируется в яичках, яичниках, тонкой кишке, сердце, скелетных мышцах, легких и поджелудочной железе; низкая экспрессия наблюдается в почках, тимусе, толстой кишке и лейкоцитах периферической крови.
• Посттрансляционные модификации включают ацетилирование и фосфорилирование; белок содержит домены повторов Армадилло, необходимые для связывания NLS, и классифицируется как член референсного протеома, участвующий в транспорте белков и взаимодействиях «хозяин-вирус».

Экспериментальные рекомендации и технические советы

• Иммуноген нацелен на N-концевые 1–240 аминокислот человеческого KPNA4, что может обеспечить специфичность к субъединице импортина альфа по сравнению с другими членами семейства кариоферинов; однако рекомендуется валидация в соответствующей модельной системе.
• Для вестерн-блоттинга ожидается полоса в районе 58 кДа в восстанавливающих условиях; для достижения оптимального соотношения сигнал/шум рекомендуется титрование концентрации антител.
• В иммуноцитохимии и иммунофлуоресценции, поскольку KPNA4 перемещается между цитоплазмой и ядром, окрашивание может наблюдаться в обоих компартментах; ядерное накопление может быть более выраженным при определенных условиях.
• Для иммуногистохимии на парафиновых срезах демаскировка антигена и оптимизация на тканевых микрочипах, содержащих ткани с высокой и низкой экспрессией (например, яички против почек), помогут подтвердить специфичность.
• Антитела перекрестно реагируют с белками мыши и крысы, что делает их пригодными для ортологических исследований; тем не менее, перекрестную реактивность следует проверять в лизатах каждого вида.
• При использовании для ELISA учитывайте, что поликлональные антитела могут обеспечивать более широкий охват эпитопов, но также могут демонстрировать более высокий фоновый сигнал; оптимизация стадий блокировки и промывки имеет решающее значение.

CamelBio: Ваш универсальный партнер по снабжению

CamelBio выступает в качестве комплексного партнера по снабжению для производителей IVD, обеспечивая доступ «в одно окно» к сырью, такому как данные поликлональные антитела к KPNA4 для исследований ядерного импорта. Наш портфель включает валидированные пары антител, вспомогательные реагенты оптом и индивидуальный подбор редких мишеней, что обеспечивает оптимизацию закупок от этапа ранних R&D до разработки клинических анализов.