Кроличья поликлональная антитело Anti-KLKB1 для ВБ, ИГГ-Г, ИФА - P03952

Основные спецификации и параметры продукта

Биологическая справка: Функция и локализация KLKB1

• Ген KLKB1 кодирует предшественник плазменной калликреина — зимоген плазменной калликреина, сериновую протеазу, которая циркулирует в крови в виде неактивного предшественника.
• После активации плазменная калликреин участвует в поверхностно-зависимой активации свертывания крови, реципрокно активируя фактор свертывания XII (FXII) после связывания с отрицательно заряженными поверхностями.
• Она высвобождает вазоактивный пептид брадикинин из высокомолекулярного кининогена (HMWK), связывая систему контактной активации с воспалением и сосудистой проницаемостью.
• Плазменная калликреин также может участвовать в работе ренин-ангиотензиновой системы, превращая проренин в активный ренин.
• Субклеточная локализация исключительно внеклеточная; белок секретируется в плазму, где обычно и находится.
• Белок содержит сигнальный пептид, несколько доменов Apple для взаимодействия между белками и сериновпротеазный домен, подобный трипсину; он подвергается N-гликозилированию и стабилизирован дисульфидными связями.
• Генетические варианты KLKB1 ассоциированы с дефицитом прекалликреина (признак Флетчера), редким заболеванием с продленным активированным частичным тромбопластиновым временем, но обычно без тенденции к кровотечениям.

Экспериментальные рекомендации и технические советы

• Иммуноген охватывает аминокислоты 20–300 тяжелой цепи, которая содержит четыре домена Apple, отвечающие за связывание с HMWK и отрицательно заряженными поверхностями; этот регион высоко консервативен у человека, мыши и крысы, что объясняет наблюдаемую перекрестную реактивность.
• При вестерн-блоттинге может определяться полоса около 71 кДа (прекалликреин) или ~85 кДа (полноразмерный гликозилированный белок); для разделения цепей, связанных дисульфидными связями, рекомендуется восстановление с помощью DTT/TCEP.
• При иммуногистохимии (ИГГ-Г) рекомендуется использовать антигенное восстановление в цитратном буфере (pH 6,0) и детекционную систему, чувствительную к кроличьим первичным антителам; для подтверждения специфичности рекомендуется использовать контроль с преиммунной сывороткой или блокирующим пептидом.
• В ИФА антитело можно использовать в качестве захватывающего или детектирующего реагента; однако спаривание с моноклональным антителом к другому эпитопу может повысить чувствительность и специфичность.
• Поскольку плазменная калликреин содержится в больших количествах в крови, при работе с тканями грызунов в случае наблюдения неспецифического связывания предварительная адсорбция поликлонального антитела на иммобилизованных белках сыворотки мыши/крысы позволяет снизить фоновый сигнал.
• Для валидации эффективности в вашем конкретном типе образца (плазма, сыворотка, тканевой лизат) включите положительные контроли (например, очищенная плазменная калликреин или активированная плазма) и отрицательные контроли (плазма с деплецией KLKB1 или нокаутные клеточные линии, если они доступны).

CamelBio: Ваш универсальный мост для поставок

CamelBio предоставляет производителям диагностики, лабораториям и научно-исследовательским институтам беспрепятственный доступ к сырью для IVD, включая валидированные пары антител, оптимизированные моноклональные/поликлональные антитела и объемные вспомогательные реагенты. Для исследований свертывания крови и контактной системы мы также можем поставлять редкие мишени и изготовлять индивидуальные иммуногены по запросу, поддерживая проекты от концепции до клиники с надежными поставками и техническими консультациями.