Поликлональное антитело против KLK6 для Вестерн-блоттинга (WB), ИФА - Q92876

Основные характеристики и параметры продукта

Биологический контекст: функция и локализация KLK6

• Калликреин-6 (KLK6), также известный как нейрозин, протеаза M, SP59 или зим, представляет собой секретируемую сериновую протеазу, кодируемую геном KLK6 (альтернативные названия PRSS18/PRSS9), принадлежащую к семейству тканевых калликреинов.
• KLK6 предпочтительно расщепляет субстраты с Arg в позиции P1 и Ser/Pro в P2, проявляя активность в отношении белка-предшественника амилоида, основного белка миелина, желатина, казеина и белков внеклеточного матрикса (фибронектин, ламинин, витронектин, коллаген).
• Протеаза расщепляет альфа-синуклеин и ингибирует его полимеризацию, что предполагает защитную роль при синуклеинопатиях, таких как болезнь Паркинсона; её дисрегуляция может способствовать патогенезу.
• В нервной системе KLK6 участвует в регуляции роста аксонов после травмы спинного мозга и локализуется в нейронах серого вещества, где она колокализуется с патологическими включениями, такими как тельца Леви и глиальные цитоплазматические включения.
• Сверхэкспрессированный в первичных опухолях молочной железы, но не в метастатических опухолях, KLK6 способствует инвазии и метастазированию, поскольку опухолевые клетки, обработанные нейтрализующим антителом, демонстрируют сниженную миграцию.
• Субклеточная локализация включает секрецию, ядро/ядрышко, цитоплазму, митохондрии и микросомы.
• Посттрансляционные модификации включают гликозилирование, образование дисульфидных связей, аутокаталитическое расщепление и процессинг из зимогена в активную сериновую протеазу.
• Экспрессия в тканях наиболее высока в жидкостях (молоко, спинномозговая жидкость) и железистых тканях (слюнные железы, легкие, толстая кишка, молочная железа, почки) и обнаруживается в сером веществе мозга; не обнаруживается в нескольких других тканях, включая кожу, селезенку, печень и поджелудочную железу.

Экспериментальные рекомендации и технические советы

• Иммуноген нацелен на C-концевую область (аа 100–C-конец) человеческого KLK6, которая может распознавать как зимогенную, так и активную формы. Подтвердите специфичность с помощью соответствующих контролей (рекомбинантный белок, лизаты с нокдауном/нокаутом).
• Для Вестерн-блоттинга предсказанная молекулярная масса составляет ~26 кДа; гликозилирование может вызывать появление полосы с более высокой кажущейся молекулярной массой. Используйте положительные контроли (человеческое молоко или спинномозговая жидкость) и рассмотрите восстановительные условия для разрыва дисульфидных связей.
• Для ИФА оптимизируйте антиген для иммобилизации и разведение антител. Антитело может использоваться в качестве захватывающего или детектирующего реагента в сэндвич-ИФА; оцените перекрестную реактивность с другими калликреинами.
• KLK6 секретируется; тестируйте надосадки клеточных культур или биологические жидкости (СМЖ, молоко) наряду с лизатами. Сведите к минимуму циклы замораживания-оттаивания для сохранения целостности белка.

CamelBio: Ваш мост для комплексного снабжения

CamelBio предоставляет производителям диагностических средств, лабораториям и исследовательским институтам единую точку доступа к сырью для ИФА, техническим услугам и консалтингу от концепции до клиники. Для проектов, ориентированных на KLK6, мы предлагаем валидированные пары антител, оптимизированные моноклональные/поликлональные антитела, вспомогательные реагенты оптом и поиск сырья для редких мишеней. Наша команда поддерживает разработку биомаркеров нейродегенеративных заболеваний и онкологии с помощью комплексных решений в области цепочки поставок.