Поликлональное антитело к KAP1/TRIM28 для Вестерн-блоттинга, ИП, ИФ/ИЦХ, ИГХ-П, ИФА - Q13263

Основные характеристики и параметры продукта

Биологический контекст: функция и локализация KAP1/TRIM28

• Также известный как транскрипционный промежуточный фактор 1-бета (TIF1-бета), KRAB-ассоциированный белок 1 (KAP-1) или KRIP-1, этот белок семейства трипартитных мотивов (TRIM) массой 88,6 кДа содержит RING-домен, B-box, coiled-coil, PHD и бромодомен.
• Выступает в роли E3 SUMO- и убиквитинлигазы, формируя каркас для репрессионных транскрипционных комплексов, рекрутируя SETDB1 (гистонметилтрансферазу) и комплекс NuRD (нуклеосомный ремоделинг и деацетилирование), что приводит к метилированию H3K9 и формированию гетерохроматина.
• Служит ядерным корепрессором для цинк-пальцевых белков, содержащих KRAB-домен (KRAB-ZFPs), опосредуя сайленсинг эндогенных ретровирусов и генов, критически важных для эмбрионального развития и геномного импринтинга.
• В регуляторных T-клетках взаимодействует с изоформой 2 ZFP90, усиливая репрессорную транскрипционную активность FOXP3, что необходимо для супрессорной функции Treg-клеток. Связанные ссылки: PMID:23543754
• Поддерживает репрессированное транскрипционное состояние в недифференцированных эмбриональных стволовых клетках (ЭСК), сохраняя плюрипотентность и ранний потенциал развития. Связанные ссылки: PMID:24623306
• Выступает как позитивный регулятор сигналинга интерферона I типа (IFN-I), опосредуя Lys-63-связанную убиквитинацию TBK1, что облегчает формирование комплекса TBK1-IRF3. Связанные ссылки: PMID:38495890
• Регулирует врожденный иммунитет и воспаление через SUMOилирование ключевых медиаторов: SUMOилирование TRAF6 контролирует ядерно-цитоплазматический шаттлинг и активацию NF-kappa-B, в то время как SUMOилирование NLRP3 стабилизирует инфламмасому и усиливает его активацию. Связанные ссылки: PMID:39920527, PMID:34373456
• Локализуется преимущественно в ядре и широко экспрессируется в тканях человека, включая селезенку, тимус, простату, яички, яичники, тонкий кишечник, толстую кишку и периферические лейкоциты крови.

Экспериментальные рекомендации и технические советы

• Иммуноген охватывает C-концевую область (а.о. 576-835), содержащую PHD и бромодомен; полученное поликлональное антитело может распознавать полноразмерный KAP1/TRIM28, а также потенциальные сплайс-варианты или посттрансляционно модифицированные формы.
• Для Вестерн-блоттинга ожидается полоса около 89 кДа (предсказанная 88,6 кДа); для оптимального разрешения рекомендуется использовать 8–10% SDS-PAGE и проводить валидацию на лизатах клеток человека, мыши или крысы.
• В анализах иммунопреципитации оптимизируйте концентрацию антитела и условия лизирующего буфера; сшивание антитела с шариками может улучшить захват и снизить интерференцию от тяжелых/легких цепей.
• Для иммунофлуоресценции/ИЦХ ожидается ядерное окрашивание; используйте соответствующую фиксацию (например, 4% PFA) и пермеабилизацию (например, 0,1% Triton X-100) и включайте контрокрашивание DAPI.
• При выполнении иммуногистохимии (ИГХ-П) часто полезна демаскировка антигена в цитратном буфере (pH 6.0); всегда включайте положительные и отрицательные тканевые контроли для подтверждения специфичности.
• Для применения в ИФА, в паре с детектирующим антителом, определяйте оптимальную концентрацию антигена для иммобилизации и разведения антител эмпирически, используя известные положительные и отрицательные образцы.

CamelBio: Ваш универсальный мост для поставок

CamelBio — ваш надежный универсальный партнер в области сырья для ИВД, предлагающий валидированные антитела, подобранные пары антител, рекомбинантные белки и вспомогательные реагенты для оптимизации разработки анализов. Наша линейка продуктов KAP1/TRIM28 поддерживает исследования в области регуляции транскрипции, эпигенетики и иммунной сигнализации, доступны поликлональные и моноклональные варианты оптом. Используя нашу глобальную сеть поставщиков, мы ускоряем поиск реагентов для редких мишеней и предоставляем комплексную техническую поддержку от концепции до клиники.