Поликлональное кроличье антитело Anti-Irf3 для WB, IHC-P, ELISA — P70671

Основные характеристики и параметры продукта

Биологическая характеристика: функция и локализация Irf3

• Интерферон-регулирующий фактор 3 (Irf3) является ключевым транскрипционным регулятором врождённых иммунных ответов, зависимых от интерферонов (IFN) I типа, и играет критическую роль в противовирусной защите от ДНК- и РНК-вирусов. Он регулирует транскрипцию генов IFN I типа (IFN-alpha и IFN-beta) и генов, стимулированных IFN (ISG), связываясь с элементами ответа на стимуляцию интерфероном (ISRE) в их промоторах; при этом он действует как более мощный активатор IFNB по сравнению с IFNA. Связанные публикации:
  • PMID:15800576
  • PMID:39719712
• В неинфицированных клетках Irf3 существует в виде неактивного цитоплазматического мономера. После вирусной инфекции, воздействия двухцепочечной РНК (dsRNA) или активации толл-подобных рецепторов (TLR) он фосфорилируется киназами IKBKE и TBK1, что вызывает конформационные изменения, приводящие к димеризации, транслокации в ядро и взаимодействию с CREBBP с образованием комплекса DRAF1, который активирует транскрипцию генов IFN I типа и ISG. Irf3 также может индуцировать апоптоз в первичных макрофагах. Связанные публикации:
  • PMID:16846591
  • PMID:16979567
  • PMID:20049431
• Альтернативный сплайсинг приводит к образованию нескольких изоформ Irf3; одна из изоформ может выступать в качестве модулятора, снижая транскрипционную активность изоформы 1 за счёт конкуренции за связывание с ISRE.
• Субклеточная локализация Irf3 включает цитоплазму, ядро и митохондрии, что отражает его динамическое перемещение после активации.
• К ключевым посттрансляционным модификациям относятся фосфорилирование, ацетилирование и убиквитинирование (включая изопептидную связь и конъюгацию с Ubl), которые регулируют его активность, стабильность и взаимодействия.
• Irf3 широко экспрессируется в различных тканях, что соответствует его важной роли во врождённом иммунитете.

Рекомендации по экспериментам и технические советы

• Иммуноген соответствует аминокислотам 100–200 Irf3 мыши; этот центральный участок, вероятно, консервативен у разных видов, что подтверждает наблюдаемую перекрёстную реактивность с белками человека и крысы. При использовании антитела для других видов рекомендуется провести выравнивание последовательностей для проверки консервативности эпитопа.
• Для вестерн-блоттинга расчётная молекулярная масса составляет 46 кДа. Используйте соответствующие положительные и отрицательные контроли, например лизаты стимулированных и нестимулированных клеток, чтобы подтвердить специфичность.
• При проведении иммуногистохимии (IHC-P) оптимизируйте условия демаскировки антигена и разведение антитела для каждого типа ткани. Детекция может быть более эффективной в тканях с активированным иммунным ответом.
• Для ELISA валидируйте антитело с использованием рекомбинантного белка Irf3 или известных положительных образцов. Для разработки сэндвич-ELISA подберите соответствующее детектирующее антитело.
• Учитывая роль Irf3 во врождённом иммунитете, для повышения уровня экспрессии мишени и улучшения детекции рассмотрите стимуляцию клеток вирусными миметиками (например, poly(I:C)) или интерферонами.

CamelBio: универсальный партнёр по поиску материалов

CamelBio специализируется на обеспечении производителей изделий для диагностики in vitro (IVD), исследовательских лабораторий и разработчиков диагностических решений широким спектром сырья, технических услуг и консультационной поддержки — от концепции до клинического применения. Наш ассортимент включает валидированные пары антител, оптимизированные моноклональные и поликлональные антитела, вспомогательные реагенты для крупнооптовых поставок и услуги индивидуального поиска редких мишеней. Это поликлональное антитело Anti-Irf3 предназначено для поддержки исследований врождённого иммунитета и передачи интерфероновых сигналов; мы также можем помочь с масштабированием производства и индивидуальной конъюгацией.