Кроличье моноклональное антитело против IL1β для Вестерн-блоттинга, ИФ/МФК, ИФА - P10749

Основные спецификации и параметры продукта

Биологическое предыстория: Функция и локализация IL1β

• Интерлейкин-1 бета (IL1β) — это мощный провоспалительный цитокин, принадлежащий к семейству интерлейкина-1, кодируемый геном Il1b у мышей (ID гена: 16176, UniProt P10749). Белок синтезируется как предшественник массой 31 кДа, который расщепляется с образованием зрелой секретируемой формы.
• IL1β был первоначально идентифицирован как основной эндогенный пироген, способный вызывать лихорадку. Он стимулирует синтез простагландинов, способствует притоку и активации нейтрофилов, а также регулирует функции Т- и В-клеток, стимулируя адаптивный иммунный ответ.
• IL1β играет центральную роль в воспалительном каскаде: он синергизирует с IL12 для индуцирования продукции интерферона-гамма (IFNG) Th1-клетками и способствует дифференцировке Th17. Он также способствует ангиогенезу, индуцируя продукцию VEGF в сочетании с TNF и IL6.
• Зрелая форма IL1β высвобождается во внеклеточное пространство через неклассический путь секреции. При активации инфламмасомы и пироптозе зрелый IL1β пассивно выходит через поры газдермина-D (GSDMD) в плазматической мембране, связывая врожденное иммунное распознавание с воспалением.
• Внутриклеточно IL1β обнаруживается в цитозоле и лизосомах, а также активно секретируется. Он также связан с внеклеточными экзосомами, что указывает на наличие нескольких путей секреции (UniProt: SUBCELLULAR LOCATION).
• Экспрессия IL1β строго регулируется и преимущественно наблюдается на белковом уровне в активированных макрофагах, что согласуется с его ролью в врожденном иммунитете (UniProt: TISSUE SPECIFICITY).

Экспериментальное руководство и технические советы

• Иммуноген соответствует аминокислотам 118-269 предшественника мышиного IL1β (NP_032387.1), покрывая регион зрелого IL1β. В зависимости от образца и состояния активации антитело может распознавать как предшественник размером ~31 кДа, так и зрелую форму размером ~17 кДа. Рекомендуется использовать соответствующие маркеры молекулярного веса и положительные контроли (например, лизаты макрофагов, стимулированных LPS) для идентификации специфических полос.
• Для вестерн-блоттинга (WB) используйте восстанавливающий SDS-PAGE и стандартные протоколы переноса. Ожидается полоса около 31 кДа для полноразмерного предшественника, в то время как полоса ~17 кДа может появляться в секретируемых или расщепленных образцах.
• При иммунофлуоресценции/МФК (IF/ICC) включайте контроли стимуляции (например, LPS ± ATP) для индуцирования экспрессии и секреции IL1β, так как базовые уровни могут быть низкими. Совместное окрашивание с маркерами органелл может помочь визуализировать его цитозольную или секретируемую локализацию.
• Для ИФА рассмотрите возможность использования этого антитела в паре с подходящим детектирующим антителом, распознающим другой эпитоп, если оно используется как реагент для захвата. Валидируйте анализ с использованием стандартов рекомбинантного мышиного IL1β и биологических образцов.
• Перекрестная реактивность подтверждена для мыши; при использовании с другими видами проведите валидацию, специфичную для вида. Эндогенные мышиные IgG могут создавать фон в тканях мыши; использование антикроличьих вторичных антител и соответствующей блокировки может смягчить эту проблему.

CamelBio: Ваш мост для комплексных закупок

CamelBio сотрудничает с производителями диагностических средств и исследовательскими лабораториями для оптимизации закупок высококачественного сырья для IVD. Это кроличье моноклональное антитело против IL1β является одним из примеров нашего обширного портфеля, охватывающего ключевые иммунологические мишени, и мы поддерживаем проекты от концепции до клиники. Помимо валидированных клонов антител, мы предоставляем комплексный доступ к разработке кастомных моноклональных и поликлональных антител, оптовым закупкам вспомогательных реагентов и поиску редких мишеней, помогая вам ускорить рабочие процессы исследований воспаления и цитокинов благодаря надежным решениям поставок.