Кроличья поликлональная антитела Anti-IKKβ для Вестерн-блоттинга, IF/ICC, ELISA - O14920

Основные характеристики и параметры продукта

Биологический контекст: Функция и локализация IKKβ

• IKKβ представляет собой серин/треонин-протеинкиназу, которая служит критической каталитической субъединицей канонического IKK-комплекса, необходимого для активации передачи сигналов NF-κB под действием провоспалительных цитокинов, рецепторов распознавания паттернов и генотоксического стресса. Связанные ссылки: PMID:9346484
• Она фосфорилирует ингибиторы κB (IκB) по консервативным сериновым остаткам, запуская их K48-связанную полиубиквитинизацию и протеасомную деградацию; это высвобождает димеры NF-κB (например, p65/p50) для транслокации в ядро и транскрипции генов иммунного ответа, выживания и воспаления. Связанные ссылки: PMID:20434986, PMID:20797629, PMID:21138416
• Помимо субстратов IκB, IKKβ фосфорилирует множество партнеров по передаче сигналов, включая NEMO/IKBKG, RELA и родственные IKK киназы TBK1 и IKBKE, обеспечивая как прямую активацию, так и отрицательную регуляторную обратную связь в сети NF-κB. Связанные ссылки: PMID:11297557, PMID:14673179, PMID:20410276
• Киназа также нацелена на неканонические субстраты, такие как FOXO3 (опосредуя TNF-индуцированную инактивацию этого проапоптотического транскрипционного фактора) и STAT1 (фосфорилируемый по Thr-749 для стимулирования ARID5A-опосредованной стабилизации IL-6 и активации IL-12B), интегрируя таким образом NF-κB с апоптотическими и путями врожденного иммунитета. Связанные ссылки: PMID:15084260, PMID:32209697, PMID:38621137
• Субклеточное фракционирование и иммунофлуоресцентные исследования локализуют IKKβ преимущественно в цитоплазме, с сигнал-зависимой транслокацией в ядро и рекрутингом в мембранные рафты при определенных стимулах.
• Профилирование экспрессии в тканях выявляет высокие уровни IKKβ в сердце, плаценте, скелетных мышцах, почках, поджелудочной железе, селезенке, тимусе, простате, яичках и периферической крови, что согласуется с его ролью в повсеместном контроле воспаления.
• Посттрансляционные модификации, включая ацетилирование, гидроксилирование, S-нитрозилирование и изопептидную (убиквитин-подобную) конъюгацию, тонко регулируют стабильность, активность IKKβ и взаимодействие с регуляторными партнерами.
• В клинической практике, мутации с потерей функции в гене IKBKB связаны с тяжелым комбинированным иммунодефицитом (SCID) и другими синдромами иммунной дисрегуляции, подчеркивая ее незаменимую роль в иммунном гомеостазе.

Экспериментальные рекомендации и технические советы

• Иммуноген охватывает остатки 400–669 в С-концевой половине белка IKKβ человека. Эта область находится дистально от киназного домена и может детектировать множественные сплайс-варианты или протеолитические фрагменты, что согласуется с заявленным диапазоном молекулярных масс 29–87 кДа, наблюдаемым в Вестерн-блоттинге. Рекомендуется использовать коктейли ингибиторов протеаз во время подготовки образцов для сохранения полноразмерных форм белка.
• Для Вестерн-блоттинга валидируйте специфичность с помощью нокдауна siRNA или нокаута CRISPR-Cas9 в соответствующей клеточной системе и сравнивайте с предсказанной молекулярной массой полноразмерного белка ~87 кДа. Для IF/ICC ожидайте как цитоплазматическое, так и индуцируемое ядерное окрашивание; проводите двойное окрашивание с ядерным маркером и проверяйте с помощью соответствующих негативных контролей.
• В ELISA используйте рекомбинантный белок IKKβ или пептид-иммуноген в качестве позитивного контрольного антигена и титруйте антитело, используя стандартный непрямой протокол, для оптимизации соотношения сигнал/шум.

CamelBio: Ваш единый источник поставок

• CamelBio обеспечивает производителей диагностических средств, лаборатории и научно-исследовательские институты полным портфелем сырья для IVD, технических услуг и консалтинга по нормативным требованиям, поддерживая проекты от концепции до коммерциализации. Наш каталог включает валидированные пары антител, оптимизированные моноклональные и поликлональные антитела, вспомогательные реагенты в больших объемах и возможность поиска редких мишеней на заказ для ускорения разработки ваших тест-систем.
• Кроличьи поликлональные антитела IKKβ (O14920) являются примером нашей приверженности поставке высококачественных реагентов для исследований в области иммуноанализа и воспаления. Используйте CamelBio в качестве вашего единственного партнера по закупкам для всех связанных с IKKβ материалов, включая подобранные детектирующие антитела, рекомбинантные белки и специализированные буферы, необходимые для воспроизводимых диагностических процедур.