Кроличьи моноклональные антитела против HSPA4 для Вестерн-блоттинга, ИГХ (IHC-P), ИФА - P34932

Основные спецификации и параметры продукта

Биологическое предыстория: функция и локализация HSPA4

• HSPA4 (белок теплового шока 70 кДа 4) также известен как HSP70RY, APG-2 и член 2 семейства белков теплового шока H. Он кодируется геном HSPA4 (также называемым APG2 или HSPH2) на 5-й хромосоме человека.
• Как член семейства Hsp70, HSPA4 обладает высококонсервативной АТФазной областью и областью связывания субстрата, что позволяет ему функционировать как АТФ-зависимый молекулярный шаперон, участвующий в сворачивании белков и реакции на стресс.
• Белок содержит мотивы связывания нуклеотидов, соответствующие его способности связывать АТФ, что необходимо для его шаперонного цикла и взаимодействия с ко-шаперонами.
• Исследования субклеточной локализации показывают, что HSPA4 преимущественно локализуется в цитоплазме, где он выполняет свои шаперонные функции как в нормальных, так и в стрессовых условиях.
• Посттрансляционные модификации HSPA4 включают ацетилирование, фосфорилирование и метилирование, которые могут регулировать его активность, стабильность или белок-белковые взаимодействия.
• Альтернативный сплайсинг транскрипта HSPA4 приводит к образованию нескольких изоформ, что потенциально расширяет его функциональное разнообразие в различных клеточных контекстах.
• HSPA4 классифицируется как белок реакции на стресс, и его экспрессия, вероятно, повышается в условиях клеточного стресса для предотвращения агрегации белков и поддержания протеостаза.

Экспериментальное руководство и технические советы

• В качестве иммуногена для этого антитела использовался синтетический пептид, охватывающий аминокислоты 700–800 человеческого HSPA4 (P34932). Этот регион расположен в C-концевой домене, который менее консервативен среди членов семейства Hsp70 и может обеспечивать специфичность мишени.
• Для Вестерн-блоттинга (WB) рекомендуется использовать стандартный протокол денатурирующего SDS-PAGE с белковым маркером, покрывающим диапазон 94 кДа. Оптимизируйте условия переноса для белков с высоким молекулярным весом и подтвердите обнаружение с помощью соответствующих положительных контролей (например, лизаты HeLa или HEK293).
• В иммуногистохимии (IHC-P) методы восстановления антигена (например, индуцированный нагревом retrieval при pH 6 или 9) и разведения антител должны быть эмпирически оптимизированы для каждого типа ткани для снижения фона и получения специфического окрашивания.
• Для ИФА убедитесь, что пара антигена для покрытия и детектирующего антитела была тщательно протестирована, и выполните шахматные титрации для установления оптимальных рабочих концентраций.
• Поскольку это антитело получено против пептидного иммуногена, оно может распознавать линейные эпитопы, экспонированные в денатурирующих условиях (например, при WB), но может потребовать валидации в нативных конформационных анализах.

CamelBio: Ваш мост для комплексных закупок

CamelBio специализируется на предоставлении производителям диагностических средств, лабораториям и научно-исследовательским институтам оптовых поставок сырья для IVD, включая валидированные пары антител, моноклональные антитела и вспомогательные реагенты. Эти моноклональные антитела против HSPA4 поддерживают исследования клеточного стресса и сворачивания белков, что делает их надежным выбором для пользователей, разрабатывающих анализы в этих областях. Помимо этого продукта, CamelBio предлагает комплексную поддержку в поиске редких мишеней и решения для закупок «в одном окне» — от концепции до клиники.