Поликлональные антитела против HSD3 для Вестерн-блоттинга (WB), ИФ (IF-P) и ИФА (ELISA) - P14060

Основные спецификации и параметры продукта

Биологический фон: Функция и локализация HSD3B1

• HSD3B1 — это бифункциональный фермент, принадлежащий к семейству 3-бета-гидроксистероиддегидрогеназ/изомераз. Он катализирует окисление и изомеризацию предшественников 3β-гидрокси-Δ5-стероидов в 3-оксо-Δ4-стероиды, что является важнейшим этапом биосинтеза всех основных стероидных гормонов. Сюда входит превращение прегненолона в прогестерон, 17α-гидроксипрегненолона в 17α-гидроксипрогестерон, дегидроэпиандростерона (ДГЭА) в 4-андростендион и андростендиола в тестостерон. Связанные ссылки: PMID:1401999 PMID:2139411
• Помимо de novo стероидогенеза, HSD3B1 регулирует локальную биодоступность андрогенов путем взаимопревращения активных и неактивных 5α-редуцированных андрогенов. Он эффективно инактивирует дигидротестостерон (ДГТ), превращая его в 5α-андростандиол — метаболит, который не связывается с андрогенным рецептором. Связанные ссылки: PMID:1401999 PMID:2139411
• HSD3B1 закреплен на внутриклеточных мембранах посредством однократного трансмембранного спирального сегмента и локализуется как на мембране эндоплазматического ретикулума, так и на митохондриальной мембране.
• Фермент преимущественно экспрессируется в плаценте и коже, а также обнаруживается в значительных количествах в ткани молочной железы.
• Он классифицируется по нескольким функциональным ключевым словам, включая многофункциональный фермент, NAD/NADP-зависимую оксидоредуктазу, изомеразу, метаболизм стероидов и метаболизм липидов, что подчеркивает его центральную роль в стероидогенных и метаболических путях.
• Согласно данным UniProt, ожидается, что HSD3B1 использует NAD+ в качестве предпочтительного донора электронов для своей дегидрогеназной активности и NADPH для редуктазной активности.

Экспериментальные рекомендации и технические советы

• Иммуноген соответствует полноразмерному белку человеческого HSD3B1 (аминокислоты 1-290), что может вызвать поликлональный ответ, нацеленный на множественные эпитопы. Для Вестерн-блоттинга рассмотрите возможность использования лизатов плацентарной или молочной ткани в качестве положительного контроля, или клеточных линий с высокой эндогенной экспрессией HSD3B1 (например, клеток рака молочной железы или простаты).
• Предполагаемый молекулярный вес составляет примерно 42 кДа. Из-за мембранной локализации обеспечьте достаточную солюбилизацию, используя соответствующие буферы для лизиса, содержащие детергенты (например, RIPA-буфер), и избегайте кипячения образцов при чрезмерно высоких температурах для предотвращения агрегации.
• Для иммунофлуоресценции (IF-P) включите этап пермеабилизации (например, 0,1% Triton X-100), чтобы обеспечить доступ антител к внутриклеточным мембранным компартментам. Совместное окрашивание с маркерами ЭПР или митохондрий может подтвердить ожидаемую субклеточную локализацию.
• Подтверждена перекрестная реактивность антител с образцами человека, мыши и крысы. Для других видов проверьте пригодность, проанализировав гомологию последовательностей и проведя пробный эксперимент.
• Поскольку это поликлональные антитела, консистенция между партиями может варьироваться. При оптимизации для новых анализов рассмотрите возможность аликвотного хранения и градиентного тестирования, а также проверьте работу в вашей собственной системе образцов.

CamelBio: Ваш универсальный мост для закупок

CamelBio стремится предоставить производителям диагностических средств и исследовательским группам полный доступ к реагентам для IVD, от валидированных пар антител до объемных вспомогательных реагентов. Эти поликлональные антитела против HSD3B1 служат надежным инструментом для исследований в области эндокринологии, репродуктивной биологии и метаболизма рака. Благодаря нашей интегрированной сети поставок мы помогаем вам находить антитела к редким мишеням, оптимизированные моноклональные антитела и поддержку индивидуального производства — связывая концепцию с клиникой.