Кроличье моноклональное антитело против Hsc70/HSPA8 для Вестерн-блоттинга, ИФА - P11142

Основные характеристики и параметры продукта

Биологический контекст: Функция и локализация Hsc70/HSPA8

• HSPA8 (член 8 семейства белков теплового шока A), также называемый Hsc70, HSP73 или LAP-1, является повсеместно экспрессируемым молекулярным шапероном массой 71 кДа. Он принадлежит к семейству HSP70 и является конститутивно экспрессируемым аналогом индуцируемых стрессом белков HSP70.
• Как центральный шаперон контроля качества белка, HSPA8 облегчает фолдинг белков, рефолдинг неправильно свернутых белков и нацеливание субстратов на деградацию посредством циклов связывания АТФ, гидролиза и высвобождения АДФ. Эти циклы строго регулируются кошаперами (PubMed:12526792, PubMed:21148293, PubMed:21150129). Связанные ссылки: PMID:12526792, PMID:21148293, PMID:21150129
• Сети кошаперонов точно модулируют функцию HSPA8: белки J-домена (HSP40) стимулируют АТФазную активность, факторы обмена нуклеотидов (BAG1/2/3) способствуют высвобождению АДФ, а кошапероны TPR-домена (HOPX, STUB1) направляют судьбу клиентских белков к фолдингу или деградации (PubMed:24121476, PubMed:24318877, PubMed:26865365). Связанные ссылки: PMID:24121476, PMID:24318877, PMID:26865365
• HSPA8 опосредует шаперон-зависимую аутофагию (CMA), специфически распознавая цитозольные белки, несущие мотив KFERQ, и доставляя их к лизосомальному LAMP2 для деградации (PubMed:11559757, PubMed:2799391, PubMed:36586411). Связанные ссылки: PMID:11559757, PMID:2799391, PMID:36586411
• В иммунном контексте HSPA8 связывает бактериальный липополисахарид (LPS) и способствует секреции TNF моноцитами (PubMed:10722728, PubMed:11276205). Он также помогает в презентации цитоплазматических антигенов через MHC класса II посредством взаимодействия с LAMP2 (PubMed:15894275). Связанные ссылки: PMID:10722728, PMID:11276205, PMID:15894275
• Кроме того, HSPA8 участвует в деградации, ассоциированной с ЭПР (ERAD), с E3 лигазой STUB1 (PubMed:23990462) и в разборке клатрин-опосредованных везикул через DNAJC6 (по сходству). Связанные ссылки: PMID:23990462
• Белок локализуется в нескольких клеточных компартментах, включая цитоплазму, ядро, ядрышко, меланосомы, клеточную мембрану и лизосомальную мембрану, что отражает его разнообразные функции.
• HSPA8 подвергается различным посттрансляционным модификациям, включая ацетилирование, фосфорилирование, метилирование, ISGилирование и сумоилирование, которые могут тонко настраивать его активность и взаимодействия.

Экспериментальные рекомендации и технические советы

• Антитело получено против синтетического пептида, охватывающего аминокислоты 547–646 в C-концевой области человеческого HSPA8. Этот эпитоп консервативен у мыши и крысы (на основе перекрестной реактивности), что делает антитело пригодным для исследований на этих видах.
• Для Вестерн-блоттинга ожидается полоса примерно на 71 кДа. Эндогенный HSPA8 обилен в большинстве клеточных линий и тканей; рассмотрите возможность начать с 20–50 мкг общего клеточного лизата от клеток человека (HeLa, HEK293), мыши (NIH/3T3) или крысы (PC12).
• В применениях ИФА используйте антитело в качестве захватывающего или детектирующего реагента в сэндвич-формате; проверьте иммобилизованный антиген и систему детекции с известным рекомбинантным белком или пептидным стандартом HSPA8.
• Поскольку HSPA8 взаимодействует с многочисленными кошаперами и клиентскими белками в нативных условиях, для сохранения белковых комплексов можно исследовать невосстанавливающий и нативный PAGE.

CamelBio: Ваш единый мост для поиска реагентов

CamelBio — ваш надежный единый партнер для закупки сырья для ИВД, предлагающий валидированные моноклональные антитела, рекомбинантные белки и вспомогательные реагенты. Это антитело против HSPA8 поддерживает исследования в области контроля качества белка, аутофагии и биологии стресса — в дополнение к нашим возможностям по поставке оптимизированных пар антител, больших объемов и решений для поиска редких мишеней, чтобы ускорить разработку ваших анализов.