Кроличьи моноклональные антитела против HPRT1 для Вестерн-блота и ИФА - P00492

Основные технические характеристики и параметры продукта

Биологическая справка: Функция и локализация HPRT1

• Гипоксантин-гуанин фосфорибозилтрансфераза (HPRT1) катализирует превращение гипоксантина в ИМФ и гуанина в ГМФ через путь утилизации пуринов, включающий рециклинг пуриновых оснований в нуклеотиды.
• HPRT1 переносит 5-фосфорибозную группу от 5-фосфорибозилпирофосфата (ФРПФ) на пуриновые основания, играя центральную роль в синтезе пуриновых нуклеотидов для синтеза нуклеиновых кислот и обеспечения клеток энергией.
• HPRT1 относится к семейству пуриновых/пиримидиновых фосфорибозилтрансфераз, консервативен у разных видов и кодируется геном HPRT1 (HGPRT), расположенным на Х-хромосоме.
• В клетке HPRT1 преимущественно локализуется в цитоплазме, где получает доступ к субстратам для реакций утилизации.
• Пост-трансляционные модификации HPRT1 включают ацетилирование, фосфорилирование и образование изопептидных связей (убиквитинирование), которые могут регулировать его активность или стабильность.
• Мутации в гене HPRT1 вызывают синдром Леш-Нихана — тяжелое неврологическое заболевание, а также ассоциированы с подагрой из-за избыточного синтеза пуринов, возникающего при нарушении их утилизации.
• Для работы фермент требует магний в качестве кофактора и связывает нуклеотиды, что соответствует его роли в реакции фосфорибозилтрансфера.

Экспериментальные рекомендации и технические советы

• Дизайн иммуногена на основе центральной области HPRT1 (а.к. 119–218) обеспечивает специфичность к мишени и позволяет избежать влияния вариабельности N- или C-концевых участков. Из-за высокой консервативности последовательности рекомендуется протестировать антитело в работе с соответствующими видами (человек, мышь, крыса).
• При проведении Вестерн-блота ожидаемая полоса находится на уровне примерно 25 кДа; используйте подходящие маркеры молекулярной массы. Если требуется валидация на нокаут, для подтверждения специфичности включите в эксперимент лизаты клеток с нокаутом гена HPRT1.
• В ИФА можно использовать стандартный непрямой метод с пептидом или рекомбинантным белком HPRT1; рекомендуется оптимизировать условия сорбировки антигена и разведение антитела.
• Поскольку HPRT1 экспрессируется почти во всех тканях, подтвердите его экспрессию в вашем типе образца; в некоторых экспериментах белок может использоваться как контроль загрузки.
• Перекрестная реактивность с мышиным и крысиным HPRT1 позволяет проводить трансляционные исследования; рекомендуется провести валидацию в выбранной модельной системе.

CamelBio: ваш универсальный партнер по закупкам

CamelBio помогает производителям диагностических тестов и исследовательским лабораториям получить полный доступ к высококачественному сырью для ИВД, включая валидированные антитела, антигенные пары и вспомогательные реагенты. Наше кроличье моноклональное антитело к HPRT1 входит в постоянно расширяющийся каталог мишеней для исследований метаболических и генетических заболеваний и демонстрирует надежную производительность, подтвержденную нокаут-валидацией. От характеристики моноклональных антител до поставки реагентов крупными партиями, CamelBio оптимизирует ваш канал разработки, предоставляя удобное сотрудничество с одним партнером.