Кроличье моноклональное антитело против HLA-DR для Вестерн-блоттинга, IF/ICC, ELISA - P01903

Основные спецификации и параметры продукта

Биологический контекст: функция и локализация HLA-DR

• Ген HLA-DRA кодирует альфа-цепь антигена гистосовместимости DR класса II HLA, которая соединяется с бета-цепью (HLA-DRB), формируя функциональную молекулу MHC класса II на антиген-презентирующих клетках.
• Комплекс MHCII презентирует пептиды внеклеточных антигенов (обычно 10-30 аминокислот) CD4-положительным T-клеткам, направляя эффекторные функции T-хелперов, которые запускают антителозависимый иммунитет и активацию макрофагов.
  Связанные ссылки:
  PMID:15265931, PMID:15322540, PMID:17334368
• В опухолевом микроокружении HLA-DR презентирует пептиды, происходящие из фагоцитированных апоптотических опухолевых клеток или макропиноцитированных секретируемых опухолевых белков, что связывает его с иммунным надзором за раком.
  Связанные ссылки:
  PMID:31495665
• HLA-DR также презентирует пептиды из аутолизосом после макроаутофагии — процесса, критически важного для отбора T-клеток в тимусе и центральной иммунной толерантности.
  Связанные ссылки:
  PMID:17182262, PMID:23783831
• Выбор иммунодоминантных эпитопов MHCII следует двум различным путям процессинга: "сначала связывание, затем разрезание/укорачивание" для пептидов патогенного происхождения и "сначала разрезание, затем связывание" для собственных пептидов.
  Связанные ссылки:
  PMID:25413013
• Крупный гидрофобный якорный остаток в позиции 1 пептида необходим для высокоаффинного взаимодействия со связывающей бороздкой MHCII.
  Связанные ссылки:
  PMID:8145819
• На субклеточном уровне HLA-DR располагается на клеточной мембране, но также проходит через эндоплазматический ретикулум и эндосомальные/лизосомальные компартменты, включая ранние и поздние эндосомы, лизосомы и аутолизосомы.
• Он преимущественно экспрессируется в профессиональных антиген-презентирующих клетках — макрофагах, дендритных клетках и B-клетках, а также в эпителиальных клетках тимуса, где опосредует "обучение" T-клеток.
  Связанные ссылки:
  PMID:15322540, PMID:23783831, PMID:31495665
• Ключевые структурные особенности включают сигнальный пептид, единственную трансмембранную спираль, дисульфидные связи и N-гликозилирование; также подвергается убиквитинированию.

Экспериментальные рекомендации и технические советы

• Рекомбинантный иммуноген охватывает аминокислоты 26–126 человеческого HLA-DRA, покрывая N-концевой внеклеточный домен; этот регион менее полиморфен, чем бета-цепь, и может обеспечивать широкую реактивность против аллелей HLA-DR, однако рекомендуется валидация в целевой клеточной системе.
• Для вестерн-блоттинга ожидается полоса примерно на 29 кДа в восстановительных условиях; рассмотрите возможность использования клеточных линий, полученных из АПК человека (например, Raji, дифференцированные THP-1) или тканей с высокой экспрессией MHCII в качестве положительных контролей.
• При иммунофлуоресценции/иммуноцитохимии протоколы фиксации и пермеабилизации следует оптимизировать, поскольку мишень локализована на мембране и также может обнаруживаться во внутриклеточных компартментах (эндосомы/лизосомы). Рекомендуется совместное окрашивание с мембранным маркером.
• Для ELISA это антитело может быть подходящим в качестве захватывающего или детектирующего реагента для растворимого HLA-DR или пептид-MHC комплексов; условия анализа следует титровать для установления линейности и специфичности.
• Обратите внимание, что перекрестная реактивность заявлена только для человека; перекрестная реактивность с другими видами не гарантирована. При работе с образцами нечеловекообразных приматов следует проверять гомологию последовательностей.

CamelBio: Ваш мост для комплексных поставок

CamelBio предоставляет производителям диагностических систем и исследовательским лабораториям оптимизированное комплексное решение для закупки сырья для ИХД, технических услуг и консалтинга — от концепции до клиники. Наше рекомбинантное кроличье моноклональное антитело против HLA-DR — это высокоэффективный инструмент для разработки анализов в области иммунологии и иммуноонкологии, связанных с MHC класса II. Помимо специфических моноклональных и поликлональных антител, мы предлагаем валидированные пары антител, стабильные вспомогательные реагенты и индивидуальный поиск сырья для редких мишеней, поддерживаемые надежными цепочками поставок для обеспечения непрерывности ваших анализов и удовлетворения потребностей в масштабировании.