Кроличье поликлональное антитело против гистона H3 для Вестерн-блоттинга, иммунопреципитации, иммунофлуоресценции на парафиновых срезах, иммуногистохимии на парафиновых срезах, ELISA - Q16695 / P68431

Основные характеристики и параметры продукта

Биологическая справка: Функция и локализация гистона H3.1t (H3.4)

• Ключевой компонент нуклеосомы: Гистон H3.1t является вариантом гистона H3, который функционирует как ключевой компонент нуклеосомы, упаковывая и компактизируя ДНК в хроматин. Это ограничивает доступность ДНК для клеточных механизмов и, таким образом, играет центральную роль в регуляции транскрипции, репарации ДНК, репликации ДНК и хромосомной стабильности.
• Регуляция гистонового кода: Доступность ДНК регулируется через сложный набор посттрансляционных модификаций гистонов, включая ацетилирование, метилирование, фосфорилирование, цитруллинирование, АДФ-рибозилирование, гидроксилирование и убиквитинирование, в совокупности называемых гистоновым кодом. Эти модификации критически важны для эпигенетической регуляции.
• Генное семейство и экспрессия: Принадлежа к семейству гистонов H3, этот вариант (кодируемый геном H3-4, также известным как HIST3H3) специфически экспрессируется в клетках семенников, что предполагает его роль в реорганизации хроматина во время сперматогенеза.
• Субклеточная локализация: H3.1t локализуется в ядре и хромосомах, где он формирует часть коровой частицы нуклеосомы.
• Структурные особенности: Белок содержит ДНК-связывающие домены и может модифицироваться путем образования изопептидных связей и убиквитин-подобной конъюгации, что влияет на динамику нуклеосом и структуру хроматина высшего порядка.
• Ключевые слова: 3D-структура, ацетилирование, АДФ-рибозилирование, хромосома, цитруллинирование, ДНК-связывание, гидроксилирование, изопептидная связь, метилирование, нуклеосомное ядро, ядро, фосфопротеин, протеомная идентификация, референтный протеом, убиквитин-подобная конъюгация.

Экспериментальные рекомендации и технические советы

• Дизайн иммуногена: Антитело получено против синтетического пептида, соответствующего центральной области (аа 36-136) человеческого гистона H3.1t. Эта область высококонсервативна среди вариантов H3 и у разных видов, что может объяснять предполагаемую широкую перекрестную реактивность. Исследователям следует проверять специфичность к целевому варианту в соответствующем биологическом контексте.
• Вестерн-блоттинг: Ожидается специфичная полоса примерно на уровне 15 кДа. Для улучшения детекции используйте ядерные экстракты или гистоны, экстрагированные кислотой, так как эти фракции обогащены гистонами. Рекомендуется тестирование как в денатурирующих, так и в нативных условиях геля.
• Иммунопреципитация и иммунофлуоресценция: Для иммунопреципитации условия сшивания или нативные условия могут влиять на доступность антитела из-за компактизации хроматина. Для иммунофлуоресценции на парафиновых срезах обычно требуются этапы пермеабилизации (например, Triton X-100) для детекции ядерных гистонов. Проводите валидацию на позитивных и негативных клеточных линиях.
• Иммуногистохимия на парафиновых срезах и ELISA: Для иммуногистохимии методы извлечения антигена (тепловая или ферментативная обработка) могут улучшить экспозицию эпитопа. В ELISA для подтверждения реактивности следует использовать пептид или рекомбинантный белок. Всегда включайте соответствующие контроли.

CamelBio: Ваш мост для комплексного снабжения

CamelBio предлагает комплексные решения для снабжения сырьевыми материалами для ИВД, предоставляя валидированные антительные пары, оптимизированные поликлональные антитела и основные вспомогательные реагенты оптом для производителей диагностических систем и исследователей. Это антитело против гистона H3 поддерживает приложения в области эпигенетики и биологии хроматина, а CamelBio может помочь с индивидуальными потребностями в сырье, поиском редких мишеней и техническим консультированием от концепции до клиники.