Кроличья поликлональная антитела против HIF1AN/FIH1 для Вестерн-блоттинга и ИФА - Q9NWT6

Основные характеристики и параметры продукта

Биологический контекст: функция и локализация HIF1AN/FIH1

• HIF1AN (ингибитор фактора, индуцируемого гипоксией 1-альфа), также называемый фактором, ингибирующим HIF-1 (FIH-1), является аспарагингидроксилазой, регулирующей гипоксический ответ.
• В условиях нормоксии он гидроксилирует HIF-1α по Asn-803 в C-концевом трансактивационном домене, блокируя рекрутирование коактиваторов p300/CBP и тем самым подавляя транскрипцию генов, индуцируемых гипоксией.
• Выступает в роли прямого кислородного сенсора; его гидроксилазная активность требует молекулярного кислорода, железа и 2-оксоглутарата, связывая клеточное напряжение кислорода со стабильностью и активностью HIF-1α.
• Помимо HIF-1α, HIF1AN гидроксилирует аспарагин, аспартат и гистидиновые остатки в анкириновых повторах (ARD) различных белков, включая NFKB1, NOTCH1, ASB4 и TNKS2, модулируя сигнальные пути, выходящие за рамки гипоксии.
• Негативно регулирует сигнализацию Notch путем гидроксилирования NOTCH1, что ускоряет миогенную дифференцировку; напротив, гидроксилирование ASB4 положительно способствует сосудистой дифференцировке.
• Субклеточное распределение включает как ядро, так и цитоплазму, с перинуклеарной аккумуляцией, что отражает его роль в регуляции транскрипции и взаимодействиях с цитоплазматическими белками.
• Классифицируется как диоксигеназа и железозависимая оксидоредуктаза; его активный центр содержит моноядерный железный центр, необходимый для катализа.

Экспериментальные рекомендации и технические советы

• Иммуноген охватывает практически весь белок HIF1AN (остатки 1–349), включая каталитический JmjC-домен; такая конструкция должна генерировать антитела, распознающие множественные эпитопы, что способствует детекции в денатурирующих и нативных анализах.
• Для Вестерн-блоттинга ожидается полоса около 40–41 кДа; включение лизата клеток в условиях нормоксии (например, HeLa, HEK293) в качестве позитивного контроля и образца, обработанного гипоксией, для оценки эффектов, зависящих от гидроксилирования HIF-1α, может быть информативным.
• При проведении ИФА рассмотрите возможность использования рекомбинантного HIF1AN или пептида HIF-1α для иммобилизации; сэндвич-ИФА в паре с захватывающим антителом, специфичным к другому эпитопу, может повысить специфичность.
• Предсказанная перекрестная реактивность с мышиным HIF1AN подтверждается, но производительность должна быть подтверждена с использованием соответствующих тканевых или клеточных экстрактов.
• Оптимальные разведения антител и условия анализа должны определяться эмпирически для каждой экспериментальной системы.

CamelBio: Ваш универсальный источник поставок

• CamelBio предоставляет поликлональные антитела против HIF1AN/FIH1 вместе с полным набором сырья для ИВД, включая валидированные пары антител, рекомбинантные антигены и вспомогательные реагенты для исследований гипоксии и кислородного сенсинга. От моноклональных и поликлональных антител до буферов масс-класса — CamelBio оптимизирует процесс закупок для разработчиков диагностических систем. Используйте экспертизу CamelBio в глобальных закупках для получения сырья к редким мишеням, ускоряя разработку вашего анализа от концепции до клиники.