Моноклональное антитело против HIBADH для Вестерн-блоттинга, ИГХ-П, ИФ/ИЦХ, ИФА - P31937

Основные спецификации и параметры продукта

Биологический контекст: Функция и локализация HIBADH

• HIBADH (3-гидроксиизобутиратдегидрогеназа) — это митохондриальный фермент семейства оксидоредуктаз, использующий НАД в качестве кофактора.
• Он играет ключевую роль в катаболизме аминокислот с разветвленной цепью (валин, лейцин, изолейцин), а именно в превращении 3-гидроксиизобутирата в метилмалонат-полуальдегид.
• Белок локализован в митохондриях, на что указывает его митохондриальный сигнальный пептид, который отщепляется с образованием зрелого фермента.
• Посттрансляционные модификации включают ацетилирование, которое может регулировать его ферментативную активность или стабильность.
• Экспрессия HIBADH была обнаружена в кожных фибробластах; ее экспрессию в других тканях можно предположить исходя из ее метаболической роли.
• Структурные исследования предоставили 3D-структуру HIBADH, что способствует пониманию его каталитического механизма и распознавания субстрата.
• Белок был идентифицирован с помощью прямого секвенирования белка и протеомных подходов, что подтверждает его присутствие в митохондриях человека.

Экспериментальные рекомендации и технические советы

• Иммуноген соответствует аминокислотам 37-336 человеческого HIBADH (NP_689953.1), что исключает предсказанный митохондриальный сигнальный пептид (примерно первые 36 аминокислот); следовательно, антитело, вероятно, распознает зрелую митохондриальную форму.
• Для Вестерн-блоттинга (WB) ожидается полоса примерно на 35 кДа (что согласуется с молекулярной массой 35.3 кДа по UniProt). Подтвердите специфичность, используя соответствующие положительные и отрицательные контроли (например, клетки с гиперэкспрессией HIBADH или ткани с известной экспрессией).
• При иммуногистохимии (IHC-P) и иммунофлуоресценции (IF/ICC) должны наблюдаться митохондриальные паттерны окрашивания. Совместная локализация с митохондриальными маркерами может помочь подтвердить специфичность.
• Антитело перекрестно реагирует с HIBADH человека, мыши и крысы; при работе с образцами грызунов проверьте гомологию последовательности в регионе иммуногена, чтобы убедиться в сопоставимой реактивности.
• Для применения в ИФА рекомендуется использовать рекомбинантный иммуноген в качестве положительного контроля и титровать концентрацию антитела для оптимального соотношения сигнал/шум.
• Для минимизации неспецифического связывания рекомендуется использовать подходящие блокирующие буферы (например, 5% обезжиренного молока или БСА) и оптимизировать разведение.

CamelBio: Ваш универсальный мост для поиска реагентов

CamelBio поддерживает производителей диагностических систем и исследователей, предоставляя валидированные пары антител, оптимизированные моноклональные/поликлональные антитела, объемные вспомогательные реагенты и сырье для редких мишеней. Для исследований метаболических и митохондриальных заболеваний CamelBio предлагает специфичные для HIBADH реагенты и индивидуальные решения по поставке сырья для ускорения разработки анализов. Наша универсальная цепочка поставок обеспечивает плавный переход от концепции к клиническому применению.