Моноклональное антитело против HFE для Вестерн-блоттинга, ИФА — Q30201

Основные характеристики и параметры продукта

Биологические основы: функция и локализация HFE

• HFE (белок наследственного гемохроматоза), также известный как HLA-H, представляет собой мембранный белок, который связывается с рецептором трансферрина (TFR) и снижает его сродство к нагруженному железом трансферрину, регулируя тем самым поглощение железа клетками.
• Ген, кодирующий HFE, относится к семейству MHC класса I; мутации в гене HFE ассоциированы с наследственным гемохроматозом — заболеванием, характеризующимся перегрузкой железом, что подтверждает его классификацию как белок-вариант, связанный с развитием патологии.
• Согласно данным UniProt, HFE экспрессируется во всех изученных тканях, кроме мозга, что указывает на широкое, но не всеобщее распространение в организме.
• Субклеточная локализация HFE — клеточная мембрана, где белок взаимодействует с TFR и другими белками, связанными с обменом железа, для контроля системного гомеостаза железа.
• Альтернативный сплайсинг транскрипта гена HFE приводит к образованию нескольких изоформ, которые могут иметь различную тканевую распределение и функциональные роли; основная форма — полноразмерная мембранносвязанная.
• Посттрансляционные модификации включают гликозилирование и образование дисульфидных связей, которые критически важны для правильной укладки белка и его экспрессии на поверхности клетки.

Экспериментальные рекомендации и технические советы

• Иммуноген представляет собой синтетический пептид, охватывающий аминокислотные остатки 249–348 человеческого HFE — область, включающая часть внеклеточного домена, трансмембранную спираль и цитоплазматический хвост. Такая конструкция позволяет детектировать как полноразмерную, так и некоторые усеченные формы HFE в денатурирующем Вестерн-блоттинге.
• Для Вестерн-блоттинга рекомендуется использовать лизаты суммарных белков из тканей, экспрессирующих HFE, например печень или плацента (исключая мозг, где HFE отсутствует). Оптимизируйте условия блокировки и разведения антитела под ваш конкретный тип образца.
• Для применения в ИФА эффективность работы антитела может зависеть от формата анализа (прямой, непрямой или сэндвич). Проведите валидацию клона в матрице вашего целевого образца и рассмотрите возможность спаривания с захватывающим антителом, распознающим другой эпитоп.
• Поскольку HFE является мембранным белком, обеспечьте правильную солюбилизацию и денатурацию при подготовке образца для экспонирования эпитопа, особенно если часть иммуногена расположена внутри клетки.
• Перекрестная реактивность подтверждена только для человеческого HFE; при работе с другими видами необходимо предварительно проверить гомологию последовательностей.

CamelBio: ваш единый мост для закупки реагентов

CamelBio связывает разработчиков диагностических систем с критически важным сырьем, предлагая это валидированное моноклональное антитело против HFE как часть комплексного портфеля реагентов для исследований метаболизма железа и гемохроматоза. Помимо готовых к использованию антител, мы предоставляем оптовые поставки вспомогательных реагентов и услуги индивидуального поиска редких мишеней, поддерживая все этапы вашей работы — от первичной концепции до клинического применения. Свяжитесь с нами, чтобы обсудить ваши потребности в подборе пар антител и реагентах.