Поликлональное антитело против GUCY2D для Вестерн-блоттинга и ИФА - Q02846

Основные спецификации продукта и параметры

Биологический контекст: функция и локализация GUCY2D

• GUCY2D, также известная как ретинальная гуанилилциклаза 1 (ROS-GC, GC-E), представляет собой мембранносвязанный фермент, кодируемый геном GUCY2D у человека. Среди его синонимов, связанных с различными заболеваниями, встречаются LCA1, CORD6 и CSNB1I.
• GUCY2D катализирует превращение ГТФ в цГМФ — ключевой вторичный мессенджер в фоторецепторных клетках, восполняя уровни цГМФ, которые расходуются во время фототрансдукции в палочках и колбочках. Эта активность критически важна для зрительной сигнальной трансдукции (PubMed:15123990, PubMed:21928830, PubMed:26100624). Связанные источники: PMID:15123990 PMID:21928830 PMID:26100624
• Имеются данные, что GUCY2D также может участвовать в трафике мембранносвязанных белков к мембране наружного сегмента фоторецепторов (по аналогии).
• Белок локализуется преимущественно в мембране наружного сегмента фоторецепторов и мембране эндоплазматической сети, что согласуется с его ролью в сенсорной трансдукции и процессинге белков.
• GUCY2D является гликопротеином, содержащим несколько трансмембранных спиралей, дисульфидную связь и сигнальный пептид, что характерно для его интеграции в мембрану и процессинга по секреторному пути.
• Мутации в гене GUCY2D ассоциированы с несколькими наследственными дистрофиями сетчатки, включая врожденную амавроз Лебера (LCA1), колбочково-палочковую дистрофию (CORD6) и врожденную стационарную ночную слепоту, что подчеркивает его ключевую роль в обеспечении зрения.

Экспериментальные рекомендации и технические советы

• Дизайн иммуногена: рекомбинантный слитный белок-иммуноген соответствует N-концевой области (а.к. 52–350) человеческого GUCY2D, что может быть нацелено на внеклеточный/люменальный домен. Этот рациональный дизайн обеспечивает специфичность антитела и позволяет избежать высокогидрофобных трансмембранных регионов.
• Вестерн-блоттинг (ВБ): Ожидается полоса размером около 120 кДа, что соответствует расчетной молекулярной массе ~120 кДа. Из-за гликозилирования и других модификаций фактическая миграция может отличаться. Используйте соответствующие контрольные образцы и проводите валидацию на образцах сетчатки или клетках фоторецепторного происхождения.
• ИФА: Антитело подходит для иммуноферментного анализа. Рекомендуется рассмотреть формат непрямого ИФА и проводить валидацию с использованием рекомбинантного белка или лизатов клеток, экспрессирующих GUCY2D. Перекрестная реактивность с ортологами мыши и крысы может быть полезна для трансляционных исследований.
• Подготовка образцов: Для мембранных белков типа GUCY2D необходимо обеспечить адекватную солюбилизацию с использованием подходящих детергентов; избегайте кипячения образцов, чтобы предотвратить агрегацию. Оптимизируйте условия денатурации под вашу конкретную экспериментальную установку.

CamelBio: ваш универсальный поставщик реагентов

CamelBio ускоряет разработку ИВД-тестов благодаря надежному универсальному доступу к критически важному сырью, включая валидированные пары антител, оптимизированные поликлональные антитела и объемные вспомогательные реагенты. Наше кроличье поликлональное антитело к GUCY2D поддерживает исследования в области науки о зрении и заболеваний сетчатки, а мы специализируемся на поиске реагентов к редким мишеням для удовлетворения ваших уникальных диагностических потребностей. Сотрудничайте с CamelBio, чтобы оптимизировать вашу цепочку поставок от концепции до клинических испытаний.