Моноклональное антитело против GSK-3α/β для Вестерн-блоттинга (WB), ИФ/ИЦК (IF/ICC), IF-P, IHC-P и ИФА (ELISA) - P49840/P49841

Основные спецификации и параметры продукта

Биологический фон: Функция и локализация GSK-3α/β

• GSK-3α и GSK-3β — это конститутивно активные серин/треониновые киназы, которые фосфорилируют и инактивируют гликогенсинтазу (GYS1/GYS2), тем самым отрицательно регулируя синтез гликогена и гомеостаз глюкозы.
  Связанные ссылки: PMID:11749387, PMID:17478001, PMID:19366350
• Они играют ключевую роль в сигнальном пути Wnt/β-катенин, фосфорилируя β-катенин (CTNNB1), способствуя его убиквитинированию и протеасомной деградации, что подавляет транскрипцию генов-мишеней Wnt.
  Связанные ссылки: PMID:17229088
• GSK-3α способствует патогенезу болезни Альцгеймера, облегчая процессинг белка-предшественника амилоида (APP) и образование нейротоксичных амилоидных бляшек.
  Связанные ссылки: PMID:12761548
• Эти киназы участвуют в инсулиновом сигналинге: они могут опосредовать развитие инсулинорезистентности, регулируя факторы транскрипции, контролирующие метаболические гены.
  Связанные ссылки: PMID:10868943, PMID:17478001
• GSK-3α регулирует аутофагию, фосфорилируя ацетилтрансферазу KAT5/TIP60 в условиях голодания, которая, в свою очередь, ацетилирует и активирует ключевые белки аутофагии, такие как ULK1 и RUBCNL.
  Связанные ссылки: PMID:30704899
• Обе изоформы имеют N-концевой киназный домен с сайтами связывания АТФ и нуклеотидов, а их активность модулируется вышестоящими киназами путем фосфорилирования по специфическим N-концевым сериновым остаткам (Ser21 для GSK-3α, Ser9 для GSK-3β). Нарушение регуляции связано с диабетом, нейродегенерацией и раком.

Экспериментальные рекомендации и технические советы

• Для вестерн-блоттинга ожидайте полосы примерно при 46 кДа (GSK-3α) и 48 кДа (GSK-3β) в лизатах клеток или тканей человека, мыши или крысы. Используйте стандартный SDS-PAGE и нитроцеллюлозные/PVDF-мембраны.
• При иммунофлуоресценции (IF/ICC) и иммуногистохимии (IHC) соответствующим образом пермеабилизируйте клетки или выполните депарафинизацию и восстановление антигена тканей, так как GSK-3α/β преимущественно локализованы в цитоплазме, но могут также находиться в ядрах. Проверьте специфичность сигнала с помощью известных положительных и отрицательных контролей.
• Для ИФА (ELISA) рассмотрите сэндвич-формат, используя это антитело для захвата в паре с детектирующим антителом, распознающим другой эпитоп. Титруйте концентрации антител для оптимизации отношения сигнал/шум.
• Рекомбинантный белок-иммуноген предполагает, что антитело может распознавать как фосфорилированные, так и нефосфорилированные формы. Проверьте распознавание желаемого состояния модификации, обрабатывая образцы модуляторами (например, инсулином или Wnt3a для индукции фосфорилирования или ингибиторами фосфатаз для сохранения эндогенных состояний).
• Сообщается о перекрестной реактивности с ортологами мыши и крысы; однако всегда подтверждайте реактивность в вашей конкретной модельной системе, так как уровни экспрессии и посттрансляционные модификации могут различаться.

CamelBio: Ваш мост для закупок в одном месте

CamelBio выступает в качестве партнера по комплексным закупкам для разработчиков диагностических средств и исследовательских лабораторий, предлагая валидированные пары антител, оптимизированные моноклональные и поликлональные антитела, а также вспомогательные реагенты оптом. Фокусируясь на мишенях метаболизма и трансдукции сигналов, таких как GSK-3α/β, мы оптимизируем закупку высококачественного сырья для IVD, чтобы ускорить разработку ваших анализов от концепции до клиники.