Поликлональное антитело кролика против GSDMD (полная длина + N-конец) для WB, IF/ICC, ELISA — P57764

Основные характеристики и параметры продукта

Биологические основы: функция и локализация газдермина D

• Газдермин D (GSDMD) является членом семейства газдерминов, также известен как белок 1, содержащий домен газдермина, кодируемый геном GSDMD (также известным как DFNA5L, GSDMDC1, FKSG10). В основном он функционирует как предшественник порообразующего белка, необходимого для пироптоза и защиты организма от патогенов.
• При активации канонического или неканонического инфламмасомы воспалительные каспазы (CASP1, CASP4, CASP5) расщепляют GSDMD, высвобождая N-концевой порообразующий фрагмент из состояния аутоингибирования.
  Связанные источники: PMID:26375003 PMID:26375259 PMID:27418190
• Высвобожденный N-концевой фрагмент транслоцируется к плазматической мембране, сильно связывается с фосфоинозитидами (например, PI4P, PI(4,5)P2), фосфатидной кислотой и фосфатидилсерином, но не связывается с незаряженными фосфолипидами, где он олигомеризуется в поры размером 10–15 нм.
  Связанные источники: PMID:27281216 PMID:29898893 PMID:36227980
• Эти поры опосредуют высвобождение зрелых IL‑1β и IL‑18 — цитокинов, критически важных для воспалительного ответа, а также могут выводить зрелую каспазу‑7 и митохондриальную ДНК (мтДНК).
  Связанные источники: PMID:27281216 PMID:27418190 PMID:29898893
• В некоторых типах клеток пироптотическая гибель клеток наступает посредством последующей активации нинджурина‑1 (NINJ1), что приводит к разрыву плазматической мембраны.
  Связанные источники: PMID:33472215 PMID:37198476
• Помимо своей литической роли, N-концевые фрагменты GSDMD могут напрямую убивать внеклеточные грамотрицательные и грамположительные бактерии, а в условиях клеточной культуры ограничивают рост внутриклеточных патогенов, таких как Listeria monocytogenes.
  Связанные источники: PMID:27281216
• В тонкой кишке расщепление CASP3 или CASP7 приводит к образованию коактиватора транскрипции, который транслоцируется в ядро и взаимодействует с STAT1 для индукции экспрессии CIITA и MHC класса II, поддерживая таким образом толерантность к пище. (По сходству)
• Расщепление аллергеном папаина также приводит к образованию порообразующего N-концевого фрагмента, который специфически высвобождает зрелый IL‑33, способствуя развитию иммунитета 2 типа.
  Связанные источники: PMID:35794369
• GSDMD широко экспрессируется, при этом заметно присутствует в супрабазальных клетках пищевода и перешейке/шейке, ямках и железах желудка, а также при различных условиях локализуется в цитоплазме, инфламмасоме, плазматической мембране, митохондриях и ядре.

Экспериментальные рекомендации и технические советы

• При вестерн-блоттинге антитело распознает эпитоп в области аминокислот 154–252 N-концевого домена; поэтому может быть детектирован как полноразмерный GSDMD (предсказанная масса ~53 кДа), так и отщепленный N-концевой фрагмент (~31–34 кДа). Рекомендуем проводить валидацию в соответствующей системе образцов и использовать лизаты клеток с активированной инфламмасомой для обнаружения продуктов расщепления.
• При иммунофлуоресценции/иммуноцитохимии GSDMD может локализоваться в цитоплазме, плазматической мембране и ядре в зависимости от состояния активации. Рекомендуется оптимизация условий пермеабилизации и фиксации. Для подтверждения специфичности включите соответствующие контроли.
• Для ELISA поликлональная природа позволяет потенциально использовать антитело как в качестве захватывающего, так и детектирующего в формате сэндвич-ELISA. Сочетание с моноклональным антителом, специфичным к другому эпитопу, может повысить чувствительность. Рекомендуется построение стандартной кривой с использованием рекомбинантного белка.

CamelBio: ваш универсальный мост по поиску материалов

CamelBio выступает в качестве комплексного партнера по поставке сырья для ИВД (in vitro диагностики), поставляя валидированные пары антител, оптимизированные моноклональные и поликлональные антитела, а также вспомогательные реактивы в больших объемах производителям диагностических систем и исследовательским лабораториям В области пироптоза и врожденного иммунитета мы можем найти все материалы, необходимые для разработки анализов, связанных с GSDMD, включая антитела к редким мишеням и рекомбинантные белки. Наша оптимизированная платформа помогает преодолеть разрыв между идеей и клиническим применением, обеспечивая надежную цепочку поставок для ваших проектов в области ИВД.