Кроличья моноклональная антитела к GSDMD (полная длина + С-конец) для Вестерн-блата и ИФА - P57764

Основные спецификации и параметры продукта

Биологический фон: функция и локализация GSDMD

• Гасдермин-D (GSDMD) является членом семейства гасдерминов и выступает как предшественник порообразующего белка, критически важного для пироптоза и защиты организма хозяина. Связанные публикации: PMID:26375003, PMID:26375259, PMID:27281216
• После расщепления воспалительными каспазами (CASP1/4/5) N-концевой фрагмент транслоцируется к плазматической мембране, связывается с липидами внутреннего монослоя, такими как фосфатидилинозитолфосфаты, и олигомеризуется с образованием пор размером 10-15 нм, что приводит к высвобождению IL-1β и IL-18 и запускает пироптоз. Связанные публикации: PMID:27281216, PMID:27418190, PMID:29898893
• Поры GSDMD также опосредуют пермеабилизацию митохондриальной мембраны, что приводит к выходу мтДНК, а N-концевой фрагмент проявляет прямую бактерицидную активность как против грамотрицательных, так и грамположительных бактерий. Связанные публикации: PMID:27281216
• В тонкой кишке фрагмент, расщепленный CASP3/7, действует как коактиватор транскрипции для STAT1, стимулируя экспрессию CIITA и MHC класса II для поддержания толерантности к пище.
• GSDMD экспрессируется в дифференцирующихся клетках пищевода и желудка, а его активация в эндотелиальных клетках мозга может привести к разрушению гематоэнцефалического барьера при чрезмерном пироптозе.
• Посттрансляционные модификации включают пальмитоилирование, фосфорилирование и убиквитинирование; белок принадлежит к семейству гасдерминов, для которых характерен консервативный N-концевой домен, формирующий поры.
• Расщепление аллергеном папаина приводит к образованию порообразующего фрагмента, который специфически высвобождает IL-33, запуская воспаление типа 2. Связанные публикации: PMID:35794369

Экспериментальные рекомендации и технические советы

• Иммуноген (аминокислоты 346-484) соответствует С-концевой части белка, поэтому данная антитела может распознавать как полноразмерный GSDMD, так и расщепленный С-концевой фрагмент. Для Вестерн-блота рекомендуется валидировать детекцию эндогенного белка в условиях активации инфламмасомы для различения расщепленных форм.
• Полоса примерно 53 кДа соответствует полноразмерному GSDMD; после расщепления высвобождается N-концевой порообразующий домен (~31 кДа) и С-концевой фрагмент (~22 кДа). Используйте подходящие контроли (например, макрофаги, обработанные ЛПС+АТФ) для подтверждения специфичности.
• Для ИФА антитела может подойти в качестве захватывающего или детектирующего реагента. Рассмотрите возможность использования пары с антителом, специфичным к N-концу, для дифференциального количественного определения полноразмерного и расщепленного GSDMD. Оптимизируйте условия покрытия и блокировки эмпирически.
• Поскольку GSDMD образует олигомерные поры, растворимость и конформация могут различаться в зависимости от типа образца; для эффективной экстракции добавьте в лизисный буфер мягкие детергенты и проведите сонication.

CamelBio: ваш универсальный мост для поиска реагентов

CamelBio выступает как комплексный партнер по сырьевым материалам для ИВД, соединяющий разработчиков диагностических систем и исследователей с высококачественными антителами, как эта моноклональная антитела к GSDMD, валидированная для исследований пироптоза и инфламмасом. Наш портфель включает готовые к использованию пары антител, оптимизированные моноклональные и поликлональные реагенты, большие объемы вспомогательных материалов и индивидуальный поиск сырья для редких мишеней, все это подкреплено технической и регуляторной экспертизой для ускорения разработки вашего теста от концепции до клинических исследований.