Поликлональное антитело к Granzyme B для WB, IF-P, IHC-P, ELISA - P10144

Основные спецификации и параметры продукта

Биологический контекст: Функция и локализация Granzyme B

• Granzyme B, также известный как C11, CTLA-1, катепсин G-подобный 1 (CTSGL1), фрагментин-2 и HLP, представляет собой сериновую протеазу, кодируемую геном GZMB у человека. Это ключевой компонент гранул цитотоксических Т-клеток и NK-клеток.
• Эта протеаза расщепляет специфически после остатков аспарагиновой кислоты, что является общей особенностью субстратов с каспазами, что позволяет ей активировать множественные нижележащие пути гибели клеток. Соответствующие ссылки: PMID:1985927, PMID:8258716
• После доставки в клетки-мишени через иммунологический синапс, Granzyme B напрямую расщепляет газдермин-E (GSDME), высвобождая его порообразующий домен и запуская пироптоз — высоко воспалительную форму запрограммированной гибели клеток. Соответствующие ссылки: PMID:31953257, PMID:32188940
• Granzyme B также протеолитически активирует каспазы-3, -9 и -10, связывая цитотоксичность, опосредованную экзоцитозом гранул, с классическим апоптотическим каскадом. Соответствующие ссылки: PMID:9852092
• В контексте бактериальной инфекции Granzyme B может расщеплять и активировать каспазу-7 (CASP7) для облегчения репарации плазматической мембраны, что предполагается на основе сходства последовательностей.
• На субклеточном уровне Granzyme B хранится в цитолитических гранулах и секретируется из них; он содержит N-концевой сигнальный пептид и проходит активацию зимогена перед приобретением полной протеолитической активности.
• Посттрансляционные модификации включают N-связанное гликозилирование и образование дисульфидных связей, которые критически важны для правильного сворачивания, транспорта и стабильности белка.

Экспериментальные рекомендации и технические советы

• Иммуногеном является синтетический пептид, соответствующий остаткам 100–200 Granzyme B человека. Вероятно, это приводит к получению антитела, распознающего линейный эпитоп, что делает его хорошо подходящим для денатурирующих методов, таких как WB.
• Для WB рекомендуется проверять обнаружение основной полосы приблизительно при 28 кДа в восстановительных условиях, что соответствует зимогену или зрелому Granzyme B. Промежуточные продукты процессинга могут проявляться при более низких молекулярных массах.
• Учитывая перекрестную реактивность с Granzyme B мыши, это антитело можно использовать в моделях тканей или клеток мыши, но пользователям следует подтвердить видоспецифичную эффективность в своей экспериментальной системе.
• В IHC-P и IF-P оптимизируйте процедуру демаскировки антигена и разведение антитела, так как пептидный эпитоп может быть чувствителен к условиям фиксации и заливки.
• Для ELISA, прямой или сэндвич-форматы могут потребовать предварительных тестов на подбор пары; поликлональная природа антитела может обеспечить усиление сигнала, но также может увеличить фон, если не провести тщательное титрование.

CamelBio: Ваш мост для комплексных поставок

CamelBio поддерживает производителей диагностических систем и исследовательские лаборатории в секторах апоптоза и иммунологии, предлагая это поликлональное антитело к Granzyme B как часть комплексного портфолио сырьевых материалов для IVD. Помимо отдельных антител, мы предоставляем валидированные пары антител, оптимизированные моноклональные и поликлональные реагенты, вспомогательные материалы оптом и индивидуальный поиск редких мишеней. Независимо от того, разрабатываете ли вы анализ на цитотоксичность или диагностический набор, связанный с пироптозом, CamelBio упрощает процесс поставок от концепции до клиники через одно надежное B2B-партнерство.