Кроличья поликлональная антитело против GOT2 для Вестерн-блоттинга (WB), ИГХ (IHC-P), ИФ (IF/ICC) и ИФА (ELISA) - P00505

Основные спецификации и параметры продукта

Биологическое предыстория: Функция и локализация GOT2

• GOT2, также известная как митохондриальная аспартатаминотрансфераза, кинуренинаминотрансфераза 4 (KAT4) или связанный с плазматической мембраной белок, связывающий жирные кислоты (FABPpm), кодируется геном GOT2 у человека. Она относится к семейству аминотрансфераз класса I, зависимых от пиридоксальфосфата.
• Являясь ключевым ферментом малат-аспартатного челночного механизма, GOT2 необходима для поддержания внутриклеточного окислительно-восстановительного баланса NAD(H), способствуя переносу восстанавливающих эквивалентов через митохондриальную мембрану.
• GOT2 катализирует необратимое трансаминирование L-кинуренина в кинуреновую кислоту (KA), нейроактивный метаболит, связывая его с модуляцией пути кинуренина и неврологическими процессами.
• Фермент также играет роль в клеточном захвате длинноцепочечных жирных кислот благодаря своей идентичности как FABPpm на плазматической мембране, способствуя транспорту липидов.
• GOT2 преимущественно локализована в матриксе митохондрий; однако часть белка также обнаруживается на клеточной мембране, что согласуется с ее двойными функциями в митохондриальном метаболизме и захвате жирных кислот.
• Посттрансляционные модификации включают ацетилирование, метилирование, нитрирование и фосфорилирование, которые могут регулировать ее активность и субклеточное распределение. Белок синтезируется с митохондриальным транзитным пептидом, который отщепляется с образованием зрелой формы.
• Мутации в гене GOT2 связаны с развитием и эпилептической энцефалопатией 82 (DEE82), что подчеркивает его критическую роль в метаболизме мозга.

Экспериментальное руководство и технические советы

• Иммуноген соответствует остаткам 30–200 человеческого GOT2, области, включающей N-концевой сегмент зрелого митохондриального белка после отщепления транзитного пептида. Эта конструкция может способствовать распознаванию эндогенной, процессированной формы в митохондриях.
• Для Вестерн-блоттинга (WB) рассмотрите возможность обогащения митохондриальных фракций для улучшения соотношения сигнал/шум, поскольку GOT2 преимущественно является митохондриальным белком. Предполагаемый молекулярный вес предшественника составляет ~47,5 кДа, тогда как зрелый белок мигрирует вблизи 48 кДа.
• В иммунохимии (IHC-P) и иммунофлуоресценции (IF/ICC) проверьте обнаружение в тканях или клетках с высокой метаболической активностью (например, печень, сердце, мозг), где экспрессия GOT2 высока. Оптимизируйте этапы пермеабилизации и восстановления антигена для обеспечения доступа к митохондриальным эпитопам.
• Для ИФА (ELISA) используйте рекомбинантный GOT2 или лизаты тканей в качестве стандарта для установления чувствительности и специфичности анализа. Перекрестная реактивность с мышинным и крысиным GOT2 была обнаружена, что делает его подходящим для трансляционных моделей.

CamelBio: Ваш мост для комплексных закупок

CamelBio является надежным партнером для производителей IVD, предлагая комплексный доступ к сырью, техническим услугам и консалтингу от концепции до клиники. Наш портфель включает валидированные пары антител, оптимизированные поликлональные и моноклональные антитела, а также вспомогательные реактивы оптом для поддержки разработки иммуноанализов. Для исследователей, изучающих митохондриальные нарушения, эпилепсию или метаболизм жирных кислот, мы способствуем закупке реагентов для редких мишеней, таких как антитела против GOT2, и можем помочь с разработкой кастомных антител и масштабированием поставок.