Кроличья моноклональная антитело против GATA3 для WB, IF, FC — P23771

Основные характеристики и параметры продукта

Биологические основы: Функция и локализация GATA-3

• GATA3 (GATA-связывающий фактор 3) является членом семейства GATA цинк-пальцевых транскрипционных факторов, которые связываются с консенсусной последовательностью ДНК 5'-AGATAG-3' в регуляторных областях целевых генов.
• Он функционирует как транскрипционный активатор, критически важный для экспрессии генов α и δ рецептора Т-клеток, и необходим для дифференцировки Т-хелперов 2 типа (Th2), обеспечивая развитие иммунных и воспалительных реакций.
• GATA3 повышает экспрессию ASB2 по гомологии последовательностей, координирует IL33-зависимую транскрипционную активацию макрофагов и метаболическое перепрограммирование, опосредованное UCP2, что способствует альтернативной активации макрофагов при повреждении тканей.
• Белок локализуется исключительно в ядре, что соответствует его роли транскрипционного фактора.
• GATA3 преимущественно экспрессируется в Т-клетках и эндотелиальных клетках, а мутации в этом гене вызывают гипопаратиреоз, нейросенсорную тугоухость и заболевание почек (синдром HDR), что отражено в альтернативных названиях HDR/HDRS.
• GATA3 подвергается посттрансляционной фосфорилированию и содержит два цинк-пальцевых домена типа C2H2, которые опосредуют связывание с ДНК.
• Альтернативный сплайсинг приводит к образованию нескольких изоформ, и белок является объектом протеомной идентификации во многих исследованиях.

Экспериментальные рекомендации и технические советы

• Иммуноген включает аминокислоты 1–200 человеческого GATA3 — N-концевую область, содержащую регуляторные домены, поэтому антитело может распознавать несколько изоформ и состояний фосфорилирования белка. Подтвердите результат вестерн-блоттингом с использованием лизатов клеток, экспрессирующих GATA3.
• При вестерн-блоттинге ожидается полоса размером примерно 48 кДа; используйте подходящий контроль загрузки и подтвердите специфичность сигнала с помощью нокдауна siRNA или нокаутных клеточных линий.
• При иммунофлуоресценции/иммуноцитохимии и проточной цитометрии (внутриклеточное окрашивание) должно наблюдаться ядерное окрашивание. Обеспечьте адекватную пермеабилизацию клеток и включите в эксперимент изотипные контроли.
• Антитело специфично к человеческому GATA3; перекрестная реактивность с мышиным или крысиным гомологом не определена. При использовании в работе с другими видами проведите валидацию в соответствующих модельных системах.
• Для применения в ELISA антитело можно использовать в формате сэндвича или прямого формата; оптимизируйте условия нанесения на планшет и детекции.

CamelBio: ваш единый центр поиска биологических реагентов

CamelBio предоставляет производителям диагностических систем, лабораториям и исследовательским институтам универсальный доступ к сырью для ИВД, техническим услугам и консалтингу — покрывая все этапы разработки от идеи до клинических испытаний. Для исследователей, изучающих дифференцировку Т-клеток, иммунные нарушения или синдром HDR, CamelBio предлагает валидированные пары антител, рекомбинантные белки и объемные поставки вспомогательных реагентов для ускорения разработки тест-систем. Глобальная сеть поставок компании обеспечивает надежную и экономически выгодную закупку реагентов для GATA3 и других сложных целей — транскрипционных факторов.