Поликлональные антитела против GATA3 для Вестерн-блоттинга и ИФА - P23771

Основные спецификации и параметры продукта

Биологическое предыстория: Функция и локализация GATA3

• GATA3 (GATA-связывающий фактор 3) — это транскрипционный фактор с цинковыми пальцами, принадлежащий к семейству GATA, характеризующийся двумя мотивами цинковых пальцев типа C4, которые опосредуют связывание ДНК с консенсусной последовательностью 5'-AGATAG-3'.
• Он действует как активатор транскрипции, необходимый для экспрессии генов альфа- и дельта-цепей Т-клеточного рецептора, и незаменим для дифференцировки Т-хелперов 2 (Th2) во время иммунных и воспалительных ответов.
• GATA3 положительно регулирует экспрессию ASB2 (по сходству) и координирует транскрипционную активацию макрофагов, вызванную IL33, включая UCP2-зависимую метаболическую репрограммирование в сторону противовоспалительного фенотипа.
• В ответ на повреждение тканей GATA3 функционирует ниже по потоку сигнализации IL33, способствуя дифференцировке альтернативно активированных макрофагов, что способствует разрешению воспаления.
• Белок локализуется в ядре, что соответствует его роли как транскрипционного фактора, и экспрессируется преимущественно в Т-клетках и эндотелиальных клетках.
• Альтернативный сплайсинг приводит к образованию нескольких изоформ; каноническая изоформа имеет молекулярный вес около 48 кДа (рассчитано по Uniprot: 47916 Да).
• Посттрансляционные модификации включают фосфорилирование, а мутации в GATA3 связаны с глухотой и другими заболеваниями (синдром HDR).

Экспериментальные рекомендации и технические советы

• Иммуноген состоит из 260 N-концевых аминокислот человеческого GATA3, области, содержащей домены трансактивации и часть первого цинкового пальца. Такая конструкция может способствовать обнаружению как полной длины, так и определенных усеченных изоформ.
• Для Вестерн-блоттинга рекомендуются ядерные экстракты или лизаты цельных клеток из линий Т-клеток или макрофагов, стимулированных IL33; ожидается полоса вблизи 48 кДа.
• Антитела перекрестно реагируют с мышиным GATA3, что позволяет использовать их в мышинных моделях, но рекомендуется валидация в конкретной системе образцов (например, тип ткани, условия стимуляции).
• В применениях ИФА рассмотрите возможность использования рекомбинантного белка GATA3 или пептидных фрагментов в качестве стандартов для захвата и оптимизируйте блокировку для снижения фона от ядерных белков.
• В силу поликлональной природы следует контролировать воспроизводимость между партиями, а для критических экспериментов может быть полезно включение контрольного лизата с нокдауном или нокаутом.

CamelBio: Ваш комплексный мост для закупок

CamelBio выступает в качестве комплексного партнера по закупкам сырья для IVD, связывая этап открытий с разработкой регулируемых продуктов. Эти антитела против GATA3 поддерживают исследования в области биологии Т-клеток, поляризации макрофагов и путей иммунной регуляции. Помимо отдельных реагентов, CamelBio предлагает валидированные пары антител, оптимизированные моноклональные и поликлональные антитела, вспомогательные реагенты в больших объемах, а также специализированный поиск редких или труднодоступных иммунологических мишеней для оптимизации разработки диагностических тестов.